Том 69, № 1 (2024)

Представлены основные результаты 70-й сессии Научного комитета по действию атомной радиации Организации объединенных наций (НКДАР ООН), которая прошла в период с 19 по 23 июня 2023 г. В работе сессии приняли участие эксперты из 30 стран-членов НКДАР ООН, а также представители международных организаций. В рамках совещаний рабочей группы и подгрупп состоялось обсуждение документов R.757 «Повторные первичные раки после радиотерапии», R.758 «Эпидемиологические исследования радиации и рака», R.759 «Оценка облучения населения природными и иными источниками ионизирующего излучения», R.760 «Оценка влияния радиационного воздействия на заболевания системы кровообращения» и R.761 «Влияние ионизирующего излучения на нервную систему». Были также рассмотрены промежуточные отчёты Комитета: UNSCEAR/70/7 «Реализация стратегии Комитета по совершенствованию сбора, анализа и распространения данных по радиационному облучению, включая предложения специальной рабочей группы по источникам и облучению», UNSCEAR/70/8 «Реализация программы работы Комитета и проекты на период 2025–2029 гг., включая предложения специальной рабочей группы по эффектам и механизмам», рабочие материалы для этого документа «Термины, используемые Научным комитетом по действию атомной радиации», UNSCEAR/70/9 «Реализация стратегии информирования общественности и информационно-просветительской деятельности на период 2020–2024 гг. и отчёт Генеральной Ассамблее ООН.

Цель: Изучение закономерностей изменений количества фокусов фосфорилированных белков репарации двунитевых разрывов ДНК H2AX (γН2АХ) и AТМ (pAТМ) в культивируемых мезенхимальных стволовых клетках (МСК) человека через 1‒48 ч после воздействия рентгеновского излучения в дозах 40, 80, 160 и 250 мГр.

Материал и методы: В работе использовали первичную культуру МСК человека, полученную из коллекции ООО «БиолоТ» (Россия). Облучение клеток проводили на рентгеновской биологической установке РУБ РУСТ-М1 (Россия), оснащенной двумя рентгеновскими излучателями, при мощности дозы 40 мГр/мин, напряжении 100 кВ, токе трубки 0,8 мА, фильтре 1,5 мм Al, и температуре 4 °C. Для количественной оценки фокусов γН2АХ и pAТМ было проведено иммуноцитохимическое окрашивание с использованием антител к γН2АХ и pAТМ соответственно. Статистический анализ полученных данных проводился с использованием пакета статистических программ Statistica 8.0 (StatSoft). Для оценки значимости различий выборок использовали t-критерия Стьюдента.

Результаты: В ходе проведенных исследований было показано, что кинетики изменений количества фокусов γH2AX после облучения в дозах 160 и 250 мГр и малых (40‒80 мГр) дозах существенно отличаются. В отличие от существенного (на 50‒60 %) снижения количества фокусов γH2AX, наблюдаемого через 6 ч после облучения в дозах 160 и 250 мГр, после облучения в малых дозах значимого снижения фокусов γH2AX в эту временную точку не наблюдалось. Анализ солокализации фокусов γH2AX с фокусами pATM свидетельствует о том, что механизмы поддержания высокого количества фокусов γH2AX через 24‒48 ч после облучения в малых дозах являются АТМ независимыми. Выдвинута гипотеза, объясняющая феномен поддержания количества фокусов γН2AХ через 24‒48 ч после облучения в малых дозах репликативным стрессом, обусловленным стимуляцией пролиферации на фоне гиперпродукции свободных радикалов, в результате чего происходит дополнительное образование двунитевых разрывов ДНК и фосфолирирование Н2AХ киназой ATR.

Актуальность: Ряд исследователей считает перспективным направлением изучение радиозащитных свойств нетоксичных или малотоксичных природных веществ. Особое место среди них занимают антиоксиданты и участники базовых реакций метаболизма. Во избежание методологических ошибок при выполнении данных исследований необходимо провести ряд дополнительных экспериментов. К примеру, для проведения исследований свойств различных веществ на культурах клеток с использованием планшетных ридеров предварительно необходимо убедиться в том, что данные вещества не влияют на способность клеток к адсорбции на дно лунок планшета и не препятствуют пролиферации клеток. И если такое влияние будет обнаружено, дальнейшие эксперименты с данными веществами необходимо планировать с учётом полученной информации. Цель: Изучение влияния аскорбиновой, яблочной и янтарной кислот на способность клеток аденокарциномы лёгкого (A549) к адгезии в 96-луночном планшете с последующим началом пролиферации методом регистрации флуоресценции с использованием флуорофора Hoechst-33342. Методология: Эксперимент проводился в 96-луночном планшете. Рабочая концентрация Hoechst-33342 составляла 1 мкг/мл (1,62 мкМ). Флуоресценция регистрировалась на длине волны 460 нм при возбуждении проб светом длиной волны 355 нм. В эксперименте по изучению влияния аскорбата, малата и сукцината на адгезию и пролиферацию клеток в ячейки планшета вносилось по 20 000 клеток и раствор одного из указанных веществ в рабочей концентрации 2 мМ. Число клеток в лунках оценивалось на основании флуоресценции Hoechst-33342 спустя 1 сут инкубации. Результат: В пробах, содержащих 2 мМ янтарную и аскорбиновую кислоты, наблюдалось статистически значимое снижение интенсивности флуоресценции по сравнению с пробой, не содержащей препарат. Это позволяет предположить, что данные соединения негативно влияют на ростовые свойства культуры A549, тормозя адгезию клеток или замедляя их пролиферацию. Область применения результатов и выводы: Полученные результаты необходимы для методологически верного планирования дальнейших исследований на модели клеточной линии A549 с использованием флуоресцентных методов, в том числе исследований по изучению радиозащитных свойств аскорбата, малата и сукцината при воздействии редкоионизирующего и нейтронного излучения.

Цель: Провести сравнительный ретроспективный анализ результатов цитогенетических исследований лимфоцитов крови работников объекта использования ионизирующего излучения в 2003 и 2018 гг. Материал и методы: Материалом для исследования являлась венозная кровь работников объекта использования ионизирующего излучения. Исследование проведено на условно здоровых работниках (n = 11), из которых было сформировано 2 группы: группа контроля (взятие крови и цитогенетическое исследование лимфоцитов крови проведены в 2003 г.) и группа исследования (взятие крови проведено в 2018 г.). Для всех обследованных лиц проводили культивирование лимфоцитов крови и стандартный цитогенетический анализ с последующей статистической обработкой результатов. Результаты: При сравнительном ретроспективном анализе показано, что в группе исследования (2018 г.) по сравнению с группой контроля (2003 г.) снижена частота хроматидных фрагментов (p = 0,0452). Частоты других изученных типов цитогенетических нарушений (аберрантные клетки, хромосомные фрагменты, дицентрические и кольцевые хромосомы) не различаются между группами. Цитогенетические нарушения в лимфоцитах крови являются высокочувствительным методом оценки степени радиационного воздействия в раннем и отдаленном периодах после облучения и могут использоваться для биологической индикации воздействия ионизирующего излучения. Отсутствие различий показателей маркеров радиационного воздействия может быть обусловлено большим интервалом времени, прошедшим после облучения до момента обследования (15 лет), в течение которого лимфоциты с хромосомными аберрациями были элиминированы. В дальнейшем для полноты ретроспективного анализа и точности результата планируется провести исследование на большей выборке с меньшим временным интервалом между цитогенетическими исследованиями. Заключение: Результат данной работы расширяет представления о мутационном процессе в соматических клетках лиц, подвергающихся воздействию ионизирующего излучения в ходе профессиональной деятельности, и свидетельствует о его генотоксичности.

Введение: Уран, являющийся сырьевой основой атомной отрасли, способен вызывать неблагоприятные медико-биологические последствия у работников, контактирующих в процессе профессиональной деятельности с его соединениями. Для исследования данного эффекта и детального изучения медико-биологических последствий воздействия соединений урана на организм персонала объектов использования атомной энергии необходимо сформировать когорту лиц, занятых в работах с соединениями урана. Одним из ключевых элементов технологии преобразования урана, осуществляемого в рамках сублиматного производства, является получение сырьевого гексафторида урана для последующего изотопного обогащения.
Цель: Сформировать и охарактеризовать когорту сублиматного производства персонала Сибирского химического комбината, задействованного в работе с соединениями урана в период 1953–2000 гг.
Материал и методы: Источником информации служил региональный медико-дозиметрический регистр, содержащий информацию относительно всех действующих и бывших работников Сибирского химического комбината (около 65 тыс. чел.) с момента основания предприятия по настоящее время.
Результаты: Сформирована и описана когорта работников сублиматного производства Сибирского химического комбината, задействованных в работе с соединениями урана в период 1953–2000 гг. Численность когорты составляет 577 человек (475 мужчин и 102 женщины). Медико-биологическая информация и дозиметрические сведения о работниках, включённых в когорту, внесены в созданную базу данных персонала Сибирского химического комбината, задействованного в работе с соединениями урана в период 1953–2000 гг.
Заключение: Сформированная когорта позволит проводить эпидемиологические исследования по оценке заболеваемости и смертности персонала вследствие злокачественных новообразований, а также делать научно обоснованные выводы относительно роли соединений урана в возникновении и смертности вследствие злокачественных новообразований.

Цель: Демонстрация методики использования водного болюса и индивидуальных средств иммобилизации при проведении лучевой терапии поверхностных очагов опухолевого поражения в области стопы на примере лечения изолированных очагов Т-клеточной лимфомы кожи. Материал и методы: Два клинических случая пациентов с изолированными очагами Т-клеточной лимфомы кожи в области стопы, на примере которых продемонстрирована техника создания фиксирующего устройства для стопы, одновременно способного выполнять функцию болюса, а также показаны лечебные планы лучевой терапии по методикам 3D-CRT и VMAT с ретроспективной оценкой смещения мишени при данном способе фиксации. Результаты: Данная методика показывает возможность эффективно фиксировать стопу и использовать эффект «болюсного наращивания» для достижения оптимального распределения дозы ионизирующего излучения при проведении лучевой терапии поверхностных очагов опухолевого поражения.

Цель: Изучить возможности нового отечественного радиофармацевтического препарата ^99mTc-сентискан при визуализации СЛУ у больных раком молочной железы. Материал и методы: Проведено обследование 178 чел. с установленным диагнозом рака молочной железы. Пациенты разделены на две группы в зависимости от пути введения радиофармацевтического препарата. За день до оперативного лечения всем обследуемым вводился с помощью инсулинового шприца радиофармацевтический препарат активностью не более 120 МБк, в объёме 0,3‒0,4 мл. Визуализируемые СЛУ маркировались на коже запатентованным устройством – «Устройство для наружного маркирования зон повышенного накопления радиофармацевтического препарата» (Патент на полезную модель RU 218690 U1). Интраоперационный поиск СЛУ осуществлялся с помощью гамма-зондов Gamma-Finder II или Радикал с последующим срочным гистологическим исследованием. Результаты: Радиоизотопная визуализация СЛУ при использовании отечественного радиофармацевтического препарата ^99mTc-сентискан: в первой группе (препарат вводился перитуморально) составила 100 %, среднее количество визуализируемых лимфатических узлов в данной группе ‒ 2,2; во второй группе (препарат вводился субареолярно) ‒ 99,1 %, среднее количество визуализируемых лимфатических узлов ‒ 2,6. В первой группе пациентов метастатическое поражение СЛУ выявлено в 8 случаях (13,1 %), а во второй группе ‒ в 14 (11,9 %). Все лимфатические узлы картировались в подмышечной области на стороне опухолевого процесса. Заключение: Оценена возможность препарата ^99mTc-сентискан для определения и биопсии СЛУ у больных раком молочной железы. Использование отечественного радиофармацевтического препарата ^99mTc-сентискан позволяет визуализировать сторожевые лимфатические узлы у больных раком молочной железы и обнаружить их расположение в 99,1‒100 % случаев. С учетом полученных результатов, расширенных показаний к применению радиофармпрепарата и стоимости наборов, радиофармпрепарат ^99mTc-сентискан, является более предпочтительным для применения в клинической практике.

Цель: Изучение микрораспределения частиц ²³⁹Pu в тканях печени работников ПО «Маяк». Это является продолжением работ по изучению микрораспределения частиц ²³⁹Pu в тканях легких работников ПО «Маяк», выполненных ранее и опубликованных. Материал и методы: Для исследования распределения размеров наночастиц ²³⁹Pu использовался нейтронно-индуцированный метод детектирования треков частиц, возникающих при делении атомов ²³⁹Pu. В ЮУрИБФ данный метод был усовершенствован, оптимизирован и адаптирован для исследования микрораспределения плутония в биологических тканях. Исследования образцов печени было начато в 2020 г. Были выбраны материалы для исследования микрораспределения плутония в печени из Радиологического репозитория тканей человека ЮУрИБФ. В рамках поиска современных образцов ткани печени были получены парафиновые блоки из Воронежского областного патологоанатомического бюро и из Областной больницы № 3 г. Тобольска. Нанесение образцов печени на кварцевые трековые детекторы и сборка их в определенном порядке в пластиковый контейнер для дальнейшего облучения в реакторе ИРМ производилась аналогично образцам легких. Использовались стандартные патологогистологические методики. Толщина срезов печени 5 мкм. Основной подсчет треков производили по результатам 36-минутного травления. Подсчитывали одиночные треки и звезды. Звезды с большой плотностью треков, для которых невозможно было произвести подсчет, подсчитывали по результатам 9-тиминутного травления либо напрямую, если все треки были различимы, либо в соответствии с патентом на изобретение RU 2733491 C2, который позволяет рассчитать число треков в звезде по различимым периферическим трекам. Результаты: Проведена количественная оценка микрораспределения плутония в печени у трех бывших работников ПО «Маяк», контактировавших с соединениями плутония, с использованием нейтронно-индуцированного метода измерения. Размеры обнаруженных в печени частиц ²³⁹PuO₂ не превысили 20 нм. Также проведены исследования образцов печени жителей из Озерска, Тобольска, Воронежа, не работавших на ПО «Маяк». Плотности треков, обусловленных делением природного урана и плутония, содержащихся в биологических тканях, различались не более чем в 2 раза для фоновых случаев, взятых из разных регионов. Произведено сравнение с результатами аналогичного исследования, проведенного в ЮУрИБФ менее чувствительным авторадиографическим методом измерения. Настоящее исследование показало, что большая часть активности плутония содержится в печеночных дольках.