Окислительная модификация белков и активность катепсина Н тимоцитов крыс в условиях in vitro модулирования синтеза оксида азота (II)
- Авторы: Абаленихина Ю.В.1, Фомина М.А.1
-
Учреждения:
- Рязанский государственный медицинский университет
- Выпуск: Том 95, № 4 (2014)
- Страницы: 553-557
- Тип: Экспериментальная медицина
- URL: https://bakhtiniada.ru/kazanmedj/article/view/1842
- DOI: https://doi.org/10.17816/KMJ1842
- ID: 1842
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель. Изучение in vitro влияния субстрата синтеза оксида азота (L-аргинина) и неселективного ингибитора NO-синтазы (N-нитро-L-аргинин-метилового эфира) на окислительную модификацию белков в сочетании с оценкой изменений активности катепсина Н тимоцитов. Методы. Исследование проводили на крысах-самцах линии Wistar с массой тела 280-320 г. Свежевыделенные тимоциты инкубировали in vitro в полной питательной среде, содержащей 5 мМ N-нитро-L-аргинин-метиловый эфир (n=8) или 5 мМ L-аргинин, 24 ч при температуре 37 °C (n=8). Контрольная группа представляла собой тимоциты, инкубированные в тех же условиях в полной питательной среде (n=8) 24 ч. Содержание метаболитов оксида азота определяли с помощью спектрофотометрии в видимой области спектра по реакции с реактивом Грисса. Активность катепсина Н определяли спектрофлуориметрическим методом по Barrett и Kirschke. Окислительную модификацию белков оценивали по методу R.L. Levine в модификации Е.Е. Дубининой, с последующим количественным анализом спектра поглощения карбонильных производных. Результаты. В условиях моделирования дефицита синтеза оксида азота увеличивалась степень окислительной модификации белков, в основном за счёт количества альдегид- и кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального и основного характера. Указанные изменения сопровождались увеличением активности катепсина Н. В условиях стимуляции синтеза оксида азота количество окислительно-модифицированных белков снижалось в большей степени за счёт уменьшения вклада производных нейтральных аминокислотных остатков, при этом активность катепсина Н не изменялась. Вывод. In vitro неселективный ингибитор индуцибельной NO-синтазы N-нитро-L-аргинин-метиловый эфир стимулирует окислительную модификацию белков с повышением активности катепсина Н, субстрат синтеза оксида азота L-аргинин проявляет антиоксидантные свойства.
Ключевые слова
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Юлия Владимировна Абаленихина
Рязанский государственный медицинский университет
Email: abalenihina88@mail.ru
Мария Алексеевна Фомина
Рязанский государственный медицинский университет
Список литературы
- Дубинина Е.Е., Бурмистров О.С., Ходов Д.А., Поротов И.Г. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод её определения // Вопр. мед. химии. - 1995. - Т. 41, №1. - С. 24-26.
- Метельская В.А., Гуманов Н.Г. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови // Клин. лаб. диагн. - 2005. - №6. - С. 15-18.
- Муравлёва Л.Е., Молотов-Лучанский В.Б., Клюев Д.А. и др. Окислительная модификация белков: проблемы и перспективы исследования // Фундамент. исслед. - 2010. - №1. - С. 74-78.
- Селиванов Е.А., Ремизова М.И., Гербут К.А. и др. Влияние динитрозильного комплекса железа с глютатионом на течение геморрагического шока при его инфузионной терапии // Мед. академ. ж. - 2012. - Т. 12, №2. - С. 84-89.
- Barrett A.J., Kirschke H. Cathepsin B, cathepsin H, cathepsin L //Methods in Enzymol. - 1981. - Vol. 80. - P. 535-561.
- Conus S. Cathepsins and their involvement in immune responses. - Swiss Medical Weekly, 2010. - P. 1-12.
- Grimm S., Höhn A., Grune T. Oxidative protein damage and the proteasome // Amino Acids. - 2012. - Vol. 42, N 1. - P. 23-38.
- Kim C.J., Lee D.I., Lee C.H., Ahn I.S. A dityrosine-based substrate for a protease assay: application for the selective assessment of papain and chymopapain activity // Anal. Chim. Acta. - 2012. - Vol. 20, N 723. - P. 101-107.
- Kumar S., Kumar M.S., Raja B. Efficacy of piperine, an alkaloidal constituent of pepper on nitric oxide, antioxidants and lipid peroxidation markers in L-NAME induced hypertensive rats // Int. J. Res. Pharm. Sci. - 2010. - Vol. 1, N 3. - P. 300-307.
- Radi R. Peroxynitrite, a stealthy biological oxidant // J. Biol. Chem. - 2013. - Vol. 288, N 37. - P. 26 464-26 472.
- Vittorio C., Cornelius С., Rizzarelli Е. et al. Nitric oxide in cell survival: a janus molecule // Antioxid. Redox Signal. - 2009. - Vol. 11, N 11. - P. 2717-2739.
- Wall S.B., Oh J.Y., Diers A.R., Landar A. Oxidative modification of proteins: an emerging mechanism of cell signaling // Front Physiol. - 2012. - Vol. 14, N 3. - P. 369.
- Wink D.A., Hines H.B., Cheng R.Y. et al. Nitric oxide and redox mechanisms in the immune response // J. Leukocyte Biol. - 2011. - Vol. 89. - P. 873-891.
Дополнительные файлы
