Изменение уровня экспрессии тирозиназы в пигментном эпителии сетчатки на фоне развития экспериментальной дегенерации зрительного нерва

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. При дегенерации зрительного нерва различного генеза наиболее уязвимы нейроны сетчатки, и их состояние в этих условиях изучено достаточно подробно. Вместе с тем очень важную роль выполняет пигментный эпителий сетчатки, реализующий синтез меланина и выполняющий антиоксидантную, фагоцитарную, транспортную, защитную, гомеостатическую функции. Тирозиназа служит ключевым ферментом меланогенеза клетками этого эпителия. Разработка методов ранней диагностики атрофии зрительного нерва чрезвычайно важна в связи с тем, что функциональные нарушения зрения появляются позже структурных, на более запущенных стадиях заболевания. Пигментный эпителий сетчатки не может быть не чувствителен к процессам, протекающим при дегенерации зрительного нерва. Вот почему его изучение при экспериментальной дегенерации зрительного нерва необходимо для более полного понимания процессов, происходящих в зрительном анализаторе в этих условиях.

Цель. Изучить изменение уровня экспрессии тирозиназы в пигментном эпителии сетчатки в различные сроки развития экспериментальной дегенерации зрительного нерва на основании морфологических данных.

Материал и методы. Объектом исследования были 40 глаз крыс после создания модели атрофии зрительного нерва при помощи метанола. Животные были разделены на пять групп: первая группа — контрольная; вторая-пятая группы — животные, энуклеацию глаз которых производили через 1, 3, 6 и 9 нед соответственно после создания аминофиллин-метаноловой модели атрофии зрительного нерва. Пигментный эпителий сетчатки был изучен методом флюоресцирующих антител к тирозиназе Тyrosinase Mouse Monoclonal. Иммунофлюоресцентное окрашивание проводили на поперечных фиксированных срезах глазного яблока. Статистический анализ и визуализация полученных данных осуществлены с использованием среды для статистических вычислений R 4.2.2.

Результаты. При сравнительном анализе полученных результатов было выявлено, что уровень экспрессии тирозиназы в пятой группе был в среднем в 4,21 раза [95% доверительный интервал (ДИ) 2,49–7,13, p=0,00076], 9,31 раза (95% ДИ 5,47–15,85, p=0,00033), 2,63 раза (95% ДИ 1,51–4,58, p=0,0009) и 3,44 раза (95% ДИ 1,96–6,03, p=0,00055) выше по сравнению с первой, второй, третьей и четвёртой группами соответственно. Уровень тирозиназы в экспериментальных образцах в первой, третьей и четвёртой группах был статистически значимо выше по сравнению с уровнем тирозиназы во второй группе в среднем в 2,21 раза (95% ДИ 1,33–3,66, p=0,0003), 3,53 раза (95% ДИ 2,08–6,02, p=0,00069) и 2,71 раза (95% ДИ 1,58–4,65, p=0,00022) соответственно.

Вывод. По мере развития дегенеративных процессов в волокнах зрительного нерва в этих условиях происходит нарушение целостности пигментного эпителия сетчатки, что характеризуется повышением количества антител к тирозиназе в пигментном эпителии сетчатки экспериментальных животных.

Об авторах

Айгуль Маратовна Бариева

Казанский государственный медицинский университет; Республиканская клиническая офтальмологическая больница

Автор, ответственный за переписку.
Email: rezaig@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9009-1273
SPIN-код: 2781-5770

асс., каф. офтальмологии; врач-офтальмолог

Россия, г. Казань; г. Казань

Виктор Владимирович Валиуллин

Казанский государственный медицинский университет

Email: valiullinvv@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0299-696X
SPIN-код: 7170-4257

д-р биол. наук, проф., каф. гистологии, цитологии и эмбриологии

Россия, г. Казань

Александр Николаевич Самойлов

Казанский государственный медицинский университет; Республиканская клиническая офтальмологическая больница

Email: samoilovan16@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-0863-7762
SPIN-код: 8555-2067

д-р мед. наук, проф., зав. каф., каф. офтальмологии

Россия, г. Казань; г. Казань

Список литературы

  1. Biousse V., Newman N.J. Diagnosis and clinical features of common optic neuropathies // Lancet Neurol. 2016. Vol. 15, N. 13. P. 1355–1367. doi: 10.1016/S1474-4422(16)30237-X
  2. Mackay D.D., Garza P.S., Bruce B.B., et al. The demise of direct ophthalmoscopy: A modern clinical challenge // Neurol Clin Pract. 2015. Vol. 5, N. 2. P. 150–157. doi: 10.1212/CPJ.0000000000000115
  3. Drexler W., Morgner U., Ghanta R.K., et al. Ultrahighresolution ophthalmic optical coherence tomography // Nat Med. 2001. Vol. 7, N. 4. P. 502–507. doi: 10.1038/86589
  4. Файзрахманов Р.Р., Босов Э.Д., Богданова В.А., и др. Морфофункциональные особенности пигментного эпителия сетчатки в норме и при возрастной макулярной дегенерации // Офтальмохирургия. 2023. № 3. С. 106–111. doi: 10.25276/0235-4160-2023-3-106-111
  5. Marmor M.F., Wolfensberger T.J. The retinal pigment epithelium: Function and disease. New York: Oxford University Press, 1998. P. 103–134.
  6. Parapuram S.K., Chang B., Li L., et al. Differential effects of TGFbeta and vitreous on the transformation of retinal pigment epithelial cells // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009. Vol. 50, N. 12. P. 5965–5974. doi: 10.1167/iovs.09-3621
  7. Нордстрем Б. Биоэлектрические цепи организма // Вестник биофизической медицины. 1996. № 1. P. 27–31.
  8. Trip S.A., Schlottmann P.G., Jones S.J., et al. Optic nerve atrophy and retinal nerve fibre layer thinning following optic neuritis: Evidence that axonal loss is a substrate of MRI-detected atrophy // Neuroimage. 2006. Vol. 31, N. 1. P. 286–293. doi: 10.1016/j.neuroimage.2005.11.051
  9. Карлсон Б.М. Регенерация. Москва: Наука, 1986. 296 с.
  10. Дудел Дж., Рюэгт И., Шмидт Р. Физиология человека. В 4. т. Пер. с англ. Т. 1. Москва: Мир, 1985. 272 с.
  11. Мулдер М. Введение в мембранную технологию. Пер. с англ. Москва: Мир, 1999. 513 с.
  12. Самойлов А.Н., Валиуллин В.В., Бариева А.М., и др. Способ создания токсической модели атрофии зрительного нерва. Патент №RU 2786324 C1. МПК G09B 23/28. Бюл. №35 от 20.12.2022.
  13. Меньшикова М.В., Долгих О.В., Агафонов Ю.В., Зашихин А.Л. Цитология. Учебное пособие к практическим занятиям. Архангельск: Изд-во Северного государственного медицинского университета, 2016. 136 с.
  14. Барбан П.С., Пшеничнов Р.А., Пантюхина А.Н. Ившина И.Б. Иммунофлуоресцентный анализ. Свердловск: УрО АН СССР, 1988. 176 с.
  15. Testa F., Maguire A.M., Rossi S., et al. Three-year follow-up after unilateral subretinal delivery of adeno-associated virus in patients with Leber congenital Amaurosis type 2 // Ophthalmology. 2013. Vol. 120, N. 6. P. 1283–1291. doi: 10.1016/j.ophtha.2012.11.048

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Сетчатка крысы на разных сроках после формирования атрофии зрительного нерва (АЗН). Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ×20

Скачать (204KB)
3. Рис. 2. Уровень экспрессии тирозиназы в пигментном эпителии сетчатки в экспериментальных группах; ***p <0,001

Скачать (31KB)
4. Рис. 3. Сетчатка крысы на разных сроках после формирования атрофии зрительного нерва (АЗН). Иммунофлюоресцентное изучение экспрессии тирозиназы при помощи моноклональных антител. Сагиттальный срез глаз, окрашенный антителами к тирозиназе (зелёное свечение). Ядра клеток докрашены реактивом DAPI (синее свечение). Увеличение ×20

Скачать (108KB)

© 2024 Эко-Вектор



Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».