Цитопротективный эффект неопиатного аналога лей-энкефалина в первичной культуре пульмональных фибробластов в условиях окислительного стресса
- Авторы: Сазонова Е.Н.1,2, Лебедько О.А.1,2, Денисюк Г.А.1, Жмеренецкий К.В.1, Добрых В.А.1
-
Учреждения:
- Дальневосточный государственный медицинский университет
- Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания - Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства
- Выпуск: Том 100, № 1 (2019)
- Страницы: 153-157
- Тип: Экспериментальная медицина
- URL: https://bakhtiniada.ru/kazanmedj/article/view/11018
- DOI: https://doi.org/10.17816/KMJ2019-153
- ID: 11018
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель. Анализ цитопротективного влияния неопиатного аналога лей-энкефалина (Phe-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg) в первичной культуре пульмональных фибробластов в условиях окислительного стресса.
Методы. Инкубацию пульмональных фибробластов с неопиатным аналогом лей-энкефалина (Phe-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg) проводили в течение 6 ч при концентрации пептида в культуральной среде 0,1 мкМ. Для моделирования окислительного стресса в культуральную среду на 2 ч добавляли 60 мкМ Н2О2. Экспериментальные серии включали: (1) «контроль»; (2) «неопиатный аналог лей-энкефалина» (пептид добавляли в культуральную среду через 44 ч после заключительного пересева); (3) «окислительный стресс» (Н2О2 добавляли в культуральную среду через 48 ч после заключительного пересева); (4) «неопиатный аналог лей-энкефалина + окислительный стресс» (пептид добавляли в культуральную среду через 44 ч, Н2О2 - через 48 ч после заключительного пересева). Для оценки процессов образования пульмональными фибробластами радикалов супероксид-аниона использовали метод люцигенин-зависимой хемилюминесценции. Состояние клеток оценивали с помощью компьютерной морфометрии нуклео-нуклеолярного аппарата фибробластов, окрашенных азотнокислым серебром по методу AgNOR: измеряли площадь ядер фибробластов и суммарную площадь ядрышек в ядре, определяли количество ядрышек в ядре. Указанные параметры коррелируют с активностью анаболических процессов в клетке.
Результаты. Воздействие Н2О2 на первичную культуру пульмональных фибробластов вызывало повышение генерации фибробластами радикалов супероксид-аниона, уменьшение размеров ядер фибробластов, снижение количества и размеров ядрышек. Предварительная инкубация пульмональных фибробластов с неопиатным аналогом лей-энкефалина уменьшала индуцированное Н2О2 образование радикалов супероксид-аниона, корректировала вызванные окислительным стрессом изменения нуклео-нуклеолярного аппарата фибробластов. В проведённых ранее исследованиях аналогичный эффект на сходной модели демонстрировал неселективный агонист µ/δ-опиатных рецепторов аналог дерморфина пептид седатин. В качестве механизмов реализации цитопротективного эффекта неопиатного аналога лей-энкефалина предполагается его взаимодействие с рецепторами ноцицептина (NOR-рецепторами), что требует дальнейшего исследования.
Вывод. Результаты проведённого исследования указывают на наличие у пептида Phe-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg (неопиатного аналога лей-энкефалина) прямого цитопротективного эффекта в условиях окислительного стресса.
Ключевые слова
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Елена Николаевна Сазонова
Дальневосточный государственный медицинский университет; Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания - Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства
Автор, ответственный за переписку.
Email: sazen@mail.ru
г. Хабаровск, Россия; г. Хабаровск, Россия
Ольга Антоновна Лебедько
Дальневосточный государственный медицинский университет; Хабаровский филиал Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания - Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства
Email: sazen@mail.ru
г. Хабаровск, Россия; г. Хабаровск, Россия
Галина Александровна Денисюк
Дальневосточный государственный медицинский университет
Email: sazen@mail.ru
г. Хабаровск, Россия
Константин Вячеславович Жмеренецкий
Дальневосточный государственный медицинский университет
Email: sazen@mail.ru
г. Хабаровск, Россия
Вячеслав Анатольевич Добрых
Дальневосточный государственный медицинский университет
Email: sazen@mail.ru
г. Хабаровск, Россия
Список литературы
- Лишманов Ю.Б., Маслов Л.Н., Нарыжная Н.В. и др. Эндогенная опиоидная система как звено срочной и долговременной адаптации организма к экстремальным воздействиям. Перспективы клинического применения опиоидных пептидов. Вестн. РАМН. 2012; (6): 73-82. doi: 10.15690/vramn.v67i6.287.
- Staples M., Acosta S., Tajiri N. et al. Delta opioid receptor and its peptide: a receptor-ligand neuroprotection. Int. J. Mol. Sci. 2013; 14 (9): 17 410-17 419. doi: 10.3390/ijms140917410.
- He H., Huh J., Wang H. et al. Mitochondrial events responsible for morphine's cardioprotection against ischemia/reperfusion injury. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2016; 290: 66-73. doi: 10.1016/j.taap.2015.11.019.
- Животова Е.Ю., Лебедько О.А., Тимошин С.С. Влияние структурных аналогов лей-энкефалина на процессы синтеза ДНК и свободнорадикальное окисление в слизистой оболочке желудка белых крыс. Дальневосточный мед. ж. 2012; (1): 109-112.
- Metzger T.G., Ferguson D.M. On the role of extracellular loops of opioid receptors in conferring ligand selectivity. FEBS Lett. 1995; 375 (1-2): 1-4. doi: 10.1016/0014-5793(95)01185-H.
- Симанкова А.А., Лебедько О.А., Сазонова Е.Н. Влияние регуляторных пептидов семейства опиоидов на ранние постнатальные церебральные последствия антенатальной гипоксии. Дальневосточный мед. ж. 2015; (4): 76-80.
- Самохвалов В.А., Сметанина М.Д., Мусейкина Н.Ю. и др. Влияние низкой концентрации перекиси водорода на метаболизм клеток крови. Биомед. хим. 2003; (2): 122-127.
- Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В. Свободные радикалы и клеточная хемилюминесценция. Успехи биол. хим. 2009; 49: 341-388.
- O’Donnell V.B., Azzi A. High rates of extracellular superoxide generation by cultured human fibroblasts: involvement of a lipid-metabolizing enzyme. Biochem. J. 1996; 318 (Pt. 3): 805-812. doi: 10.1042/bj3180805.
- Коржевский Д.Э. Импрегнация нитратом серебра внутриядерных структур нервных клеток после фиксации в жидкости Карнуа. Морфология. 2001; (2): 67-69.
- Фролова О.Е. Морфофункциональная характеристика моноцитов. Значение исследования нуклеолярного аппарата. Клин.-лаб. диагностика. 1998; (10): 3-8.
- Мамаев Н.Н., Мамаева С.Е. Структура и функция ядрышкообразующих районов хромосом: молекулярные, цитологические и клинические аспекты. Цитология. 1992; 34 (10): 3-15.
- Wnuk M., Lewinska A., Bugno M. et al. Oxidant-induced decrease of the expression of nucleolar organizer regions in pig lymphocytes can be useful for monitoring the cellular effects of oxidative stress. Mutat. Res. 2008; 653 (1-2): 124-129. doi: 10.1016/j.mrgentox.2008.04.006.
- Сазонова Е.Н., Самарина Е.Ю., Лебедько О.А. и др. Цитопротективное влияние агониста μ/δ-опиоидных рецепторов пептида седатин на первичную культуру пульмональных фибробластов белых крыс в условиях оксидативного стресса. Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2016; 161 (1): 51-54. doi: 10.1007/s10517-016-3340-3.
- Toll L., Bruchas M.R., Calo G. et al. Nociceptin/Orphanin FQ receptor structure, signaling, functions and interactions with opioid systems. Pharmacol. Rev. 2016; 68: 419-457. doi: 10.1124/pr.114.009209.
Дополнительные файлы
