Оценка чувствительности in vitro дрожжеподобных грибов рода candida и пробиотического штамма lactobacillus rhamnosus к антимикотическим препаратам

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Актуальность. Кандидозный вульвовагинит — одно из наиболее часто встречающихся воспалительных заболеваний влагалища. Исследователи предполагают синергическое действие лактобацилл и противогрибковых препаратов при лечении кандидозного вульвовагинита. В связи с этим представляется актуальным изучение влияния антимикотических препаратов, применяемых для лечения кандидозного вульвовагинита, на усиленный пробиотический штамм L. casei rhamnosus 35 (LCR35).

Цель — определить чувствительность к антимикотическим препаратам пробиотического штамма LCR35, входящего в состав вагинальных капсул Лактожиналь®, а также чувствительность дрожжеподобных грибов рода Candida при раздельном и совместном с лактобациллами культивировании.

Материалы и методы исследования. LCR35 культивировали на плотной среде MRS. Выросшие на среде бактерии, а также клинические изоляты C. albicans и C. parapsilosis, выделенные из влагалища, идентифицировали методом MALDI-TOF масс-спектрометрии. Определяли чувствительность дрожжеподобных грибов на модифицированном агаре Мюллера–Хинтон с 40 % глюкозой и метиленовым синим. Использовали диски с флуконазолом, вориконазолом, итраконазолом, кетоконазолом, клотримазолом, нистатином. Зоны задержки роста интерпретировали по EUCAST-2018 или по рекомендациям производителя дисков.

Результаты исследования. Пробиотический штамм LCR35 устойчив к антимикотическим препаратам, которые эффективны в отношении C. albicans и C. parapsilosis. При определении чувствительности C. albicans и C. parapsilosis к антимикотическим препаратам при раздельном и совместном с LCR35 культивировании не выявлено негативного влияния LCR35 с подавлением роста дрожжеподобных грибов.

Выводы. Пробиотический штамм LCR35, входящий в состав вагинальных капсул Лактожиналь®, устойчив к антимикотическим препаратам.

Об авторах

Елена Владимировна Спасибова

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»; ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: elena.rybina@gmail.com

врач-бактериолог лаборатории микробиологии; ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики факультета послевузовского и дополнительного профессионального образования

Россия, Санкт-Петербург

Алевтина Михайловна Савичева

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»; ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Минздрава России

Email: savitcheva@mail.ru

д-р мед. наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующая лабораторией микробиологии; заведующая кафедрой клинической лабораторной диагностики факультета послевузовского и дополнительного профессионального образования

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Overman BA. The vagina as an ecologic system. Current understanding and clinical applications. J Nurse Midwifery. 1993;38(3):146-151. https://doi.org/10.1016/0091-2182(93)90038-i.
  2. Eckert L, Hawes SE, Stevens CE, et al. Vulvovaginal candidiasis: clinical manifestations, risk factors, management algorithm. Obstet Gynecol. 1998;92(5):757-765. https://doi.org/10.1016/S0029-7844(98)00264-6.
  3. Ross RA, Lee ML, Onderdonk AB. Effect of Candida albicans infection and clotrimazole treatment on vaginal microflora in vitro. Obstet Gynecol. 1995;86(6):925-930. https://doi.org/10.1016/0029-7844(95)00318-l.
  4. Ringdahl EN. Treatment of recurrent vulvovaginal candidiasis. Am Fam Physician. 2000;61(11):3306-3312, 3317.
  5. Будиловская О.В., Шипицына Е.В., Герасимова Е.Н., и др. Видовое разнообразие вагинальных лактобацилл в норме и при дисбиотических состояниях // Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т. 66. – № 2. – С. 24–32. [Budilovskaya OV, Shipitsyna EV, Gerasimova EN, et al. Species diversity of vaginal lactobacilli in norm and in dysbiotic states. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(2):24-32. (In Russ.)]. https://doi.org/10.17816/JOWD66224-32.
  6. Elmer GW, Surawicz CM, McFarland LV. Biotherapeutic agents. A neglected modality for the treatment and prevention of selected intestinal and vaginal infections. JAMA. 1996;275(11):870-876. https://doi.org/10.1001/jama.275. 11.870.
  7. Башмакова Н.В., Волкова Н.Ю., Гнатко Е.П., и др. Пробиотик для профилактики рецидивов вульвовагинального кандидоза (результаты международного многоцентрового открытого исследования РЕВОЛАКТ) // Акушерство и гинекология. – 2017. – № 6. – С. 136–142. [Bashmakova NV, Volkova NY, Gnatko EP, et al. Probiotics for prophylaxis of vulvovaginal candidiasis relapses: Results of the international multicenter open-label REVOLACT study. Akush Ginekol (Mosk). 2017;(6):136-142. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18565/aig.2017.6.136-42.
  8. Манухин И.Б., Абашова Е.И., Базина М.И., и др. Лактобактерии LCR35 для профилактики рецидивов вульвовагинального кандидоза (результаты многоцентрового открытого неинтервенционного исследования) // Акушерство и гинекология. – 2018. – № 12. – С. 132–140. [Manukhin IB, Abashova EI, Bazina MI, et al. Lactobacteria LCR35 for prevention of relapse of vulvovaginal candidiasis: results of the multicenter open noninterventional study. Akush Ginekol (Mosk). 2018;(12):132-40. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18565/aig.2018.12.132-140.
  9. Verdenelli MC, Coman MM, Cecchini C, et al. Evaluation of antipathogenic activity and adherence properties of human Lactobacillus strains for vaginal formulations. J Appl Microbiol. 2014;116(5):1297-1307. https://doi.org/10.1111/jam.12459.
  10. Савичева А.М., Рыбина Е.В. Исследование in vitro роста, размножения, антибиотикорезистентности, конкурентных взаимоотношений штамма Lactobacillus casei rhamnosus // Акушерство и гинекология. – 2014. – № 7. – С. 79–83. [Savicheva AM, Rybina EV. In vitro study of the growth, reproduction, antibiotic resistance, and competitive relationships of a Lactobacillus casei rhamnosus strain. Akush Ginekol (Mosk). 2014;(7):79-83. (In Russ.)]
  11. Ehrström S, Daroczy K, Rylander E, et al. Lactic acid bacteria colonization and clinical outcome after probiotic supplementation in conventionally treated bacterial vaginosis and vulvovaginal candidiasis. Microbes Infect. 2010;12(10):691-699. https://doi.org/10.1016/j.micinf.2010.04.010.
  12. Russo R, Superti F, Karadja E, et al. Randomised clinical trial in women with Recurrent Vulvovaginal Candidiasis: Efficacy of probiotics and lactoferrin as maintenance treatment. Mycoses. 2019;62(4):328-335. https://doi.org/10.1111/myc.12883.
  13. De Gregorio PR, Silva JA, Marchesi A, et al. Anti-Candida activity of beneficial vaginal lactobacilli in in vitro assays and in a murine experimental model. FEMS Yeast Res. 2019;19(2). https://doi.org/10.1093/femsyr/foz008.
  14. Rossoni RD, de Barros PP, de Alvarenga JA, et al. Antifungal activity of clinical Lactobacillus strains against Candida albicans biofilms: identification of potential probiotic candidates to prevent oral candidiasis. Biofouling. 2018;34(2):212-225. https://doi.org/10.1080/08927014.2018.1425402.
  15. Allonsius CN, van den Broek MFL, De Boeck I, et al. Interplay between Lactobacillus rhamnosus GG and Candida and the involvement of exopolysaccharides. Microb Biotechnol. 2017;10(6):1753-1763. https://doi.org/10.1111/1751-7915.12799.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Рост L. rhamnosus на чашке с питательной средой MRS

Скачать (164KB)
3. Рис. 2. Отсутствие зон задержки роста L. rhamnosus вокруг дисков с антимикотиками

Скачать (254KB)
4. Рис. 3. Определение чувствительности C. albicans к антимикотическим препаратам диско-диффузионным методом

Скачать (180KB)
5. Рис. 4. Зоны задержки роста C. parapsilosis вокруг дисков с флуконазолом и вориконазолом

Скачать (224KB)
6. Рис. 5. Отсутствие различий в результатах тестирования чувствительности C. albicans к антимикотическим препаратам при раздельном и совместном с L. rhamnosus культивировании: S — чувствительный (от англ. sensitive); R — устойчивый (от англ. resistant); I — умеренно устойчивый (от англ. intermediate)

Скачать (120KB)
7. Рис. 6. Отсутствие различий в результатах тестирования чувствительности C. parapsilosis к антимикотическим препаратам при раздельном и совместном с L. rhamnosus культивировании: S — чувствительный (от англ. sensitive); R — устойчивый (от англ. resistant); I — умеренно устойчивый (от англ. intermediate)

Скачать (128KB)

© Спасибова Е.В., Савичева А.М., 2019

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».