Исследование уровня тромбоцитарных микрочастиц и экспрессии Р-селектина у пациентов с заболеваниями периферических артерий нижних конечностей

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Нарушение функциональной активности тромбоцитов приводит к прогрессированию атеросклероза и его осложнениям. Активированные тромбоциты прилипают к стенке сосуда в месте повреждения эндотелия и инициируют образование артериального тромба, что приводит к острой ишемии органа. Такие биохимические и клеточные маркеры как тромбоцитарные микровезикулы и Р-селектин могут быть проанализированы с помощью метода проточной цитометрии, в основе которого лежит специфическое взаимодействие антиген – антитело. Пациенты с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей подвергаются значительно большему риску сердечно-сосудистых и цереброваскулярных осложнений, чем лица в соответствующей по возрасту и полу популяции без заболеваний периферических артерий. Важная составляющая в патогенетической терапии сердечно-сосудистых заболеваний и профилактике их осложнений — применение антиагрегантов.

Цель — оценить уровень тромбоцитарных микрочастиц и экспрессии Р-селектина у пациентов с заболеваниями периферических артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантной терапии.

Материалы и методы. В исследование было включено 49 человек. Из них были сформированы три группы: 1) пациенты с облитерирующим заболеванием артерий нижних конечностей (n = 14) на фоне длительного приема (более 14 дней) двойной (75 мг клопидогрела и 100 мг ацетилсалициловой кислоты) антиагрегантной терапии; 2) пациенты с COVID-19 (n = 15), которые составили группу положительного контроля при определении микрочастиц тромбоцитарного происхождения; 3) здоровые добровольцы (n = 20) без признаков острого респираторного заболевания, без сердечно-сосудистых и тромбоэмболических эпизодов в анамнезе, не принимавшие антиагрегантные препараты. Функциональную активность тромбоцитов оценивали двумя методами — с помощью оптической агрегатометрии и анализа экспрессии Р-селектина на поверхности тромбоцитов с использованием проточной цитометрии. Количество тромбоцитарных микрочастиц в плазме крови определяли также с помощью проточной цитометрии.

Результаты. При оценке функциональной активности тромбоцитов методом оптической агрегатометрии было выявлено значимое снижение степени агрегации тромбоцитов в группе пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантов по сравнению с группой контроля. Аналогичные изменения были получены при анализе экспрессии Р-селектина на поверхности тромбоцитов. При сравнительном анализе процентного содержания тромбоцитарных микрочастиц с фенотипом CD9+CD41+ было выявлено, что в группе пациентов с тяжелым воспалительным процессом их количество оказалось значительно больше, чем у пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантов и в контрольной группе.

Заключение. Проведенное нами исследование отражает согласованность результатов трех различных лабораторных тестов при оценке функциональной активности тромбоцитов у пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантных препаратов.

Об авторах

Алексей Игоревич Ермаков

Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

Автор, ответственный за переписку.
Email: Ermakovspb@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3435-5881
SPIN-код: 8921-7251

заведующий клинико-диагностической лабораторией

Россия, Санкт-Петербург

Лариса Борисовна Гайковая

Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова

Email: Larisa.Gaikovaya@szgmu.ru
ORCID iD: 0000-0003-1000-1114
SPIN-код: 9424-1076

д-р мед. наук, профессор кафедры биологической и общей химии им. В.В. Соколовского

Россия, Санкт-Петербург

Ольга Васильевна Сироткина

Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова; Петербургский институт ядерной физики им. Б.П. Константинова Национального исследовательского центра «Курчатовский институт»

Email: Olga_sirotkina@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3594-1647
SPIN-код: 1780-5490

д-р биол. наук, профессор кафедры лабораторной медицины и генетики; ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики человека

Россия, Санкт-Петербург; Гатчина

Татьяна Владимировна Вавилова

Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова

Email: Vtv.lab.spb@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8537-3639
SPIN-код: 9003-6455
Scopus Author ID: 7004477312

д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой лабораторной медицины и генетики

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Еnjeti A.K., Lincz L.F., Seldon M. Detection and measurement of microparticles: an evolving research tool for vascular biology // Semin. Thromb. Hemost. 2007. Vol. 33, No. 8. P. 771–779. doi: 10.1055/s-2007-1000369
  2. Storey R., Judge H., Wilcox R.G., Heptinstall S. Inhibition of ADP-induced P-selectin expression and platelet-leukocyte conjugate formation by clopidogrel and the P2Y12 receptor antagonist AR-C69931MX but not aspirin // Thromb. Haemost. 2002. Vol. 88, No. 3. P. 488–494.
  3. Borissoff J.I., Spronk H.M., ten Cate H. The hemostatic system as a modulator of atherosclerosis // N. Engl. J. Med. 2011. Vol. 364, No. 18. P. 1746–1760. doi: 10.1056/NEJMra1011670
  4. Поляков П.И., Горелик С.Г., Железнова Е.А. Облитерирующий атеросклероз нижних конечностей у лиц старческого возраста // Вестник новых медицинских технологий. 2013. Т. 20, № 1. С. 98–101.
  5. Dormandy J., Mahir H., Ascady G. et al. Fate of the patient with chronic leg ischemia. A review article // J. Cardiovasc. Surg. (Torino). 1989. Vol. 30, No. 1. P. 50–57.
  6. van der Zee P.M., Biro E., Ko Y. et al. P-selection and CD63-exposing platelet microparticles reflect platelet activation in peripheral arterial disease and myocardial infarct // Clin. Chem. 2006. Vol. 52, No. 4. P. 657–664. doi: 10.1373/clinchem.2005.057414
  7. McEver R.P., Beckstead J.H., Moore K.L. et al. GMP-140, a platelet alpha-granule membrane protein, is also synthesized by vascular endothelial cells and is localized in Weibel–Palade bodies // J. Clin. Invest.1989. Vol. 84, No. 1. P. 92–99. doi: 10.1172/JCI114175
  8. Biasucci L.M., Porto I., Di Vito L. et al. Differences in microparticle release in patients with acute coronary syndrome and stable angina // Circ. J. 2012. Vol. 76, No. 9. P. 2174–2182. doi: 10.1253/circj.cj-12-0068
  9. Nieuwland R., Berckmans R.J., Rotteveel-Eijkman R.C. et al. Cell-derived microparticles generated in patients during cardiopulmonary bypass are highly procoagulant // Circulation. 1997. Vol. 96, No. 10. P. 3534–3541. doi: 10.1161/01.cir.96.10.3534
  10. Veira A.J., Mooberry M., Key N.S. Microparticles in cardiovascular disease pathophysiology and outcomes // J Am. Soc. Hypertens. 2012. Vol. 6, No. 4. P. 243–252. doi: 10.1016/j.jash.2012.06.003
  11. Dake M.D., Ansel G.M., Jaff M.R. et al. Durable clinical effectiveness with paclitaxel-eluting stents in the femoro-popliteal artery: 5-Year Results of the Zilver PTX Randomized Trial // Circulation. 2016. Vol. 133, No. 15. P. 1472–1483. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.115.016900
  12. Laird J.R., Schneider P.A., Tepe G. et al. Durability of treatment effect using a drug-coated balloon for femoro-popliteal lesions // J. Am. Coll. Cardiol. 2015. Vol. 66, No. 21. P. 2329–2338. doi: 10.1016/j.jacc.2015.09.063
  13. Franzone A., Piccolo R, Gargiulo G. et al. Prolonged vs short duration of dual antiplatelet therapy after percutaneous coronary intervention in patients with or without peripheral arterial disease // JAMA Cardiol. 2016. Vol. 1, No. 7. P. 795–803. doi: 10.1001/jamacardio.2016.2811
  14. Bonaca M.P., Bhatt D.L., Storey R.F. et al. Ticagrelor for prevention of ischemic events after myocardial infarction in patients with peripheral artery disease // J. Am. Coll. Cardiol. 2016. Vol. 6, No. 23. P. 2719–2728. doi: 10.1016/j.jacc.2016.03.524
  15. Ault K.A. The clinical utility of flow cytometry in the study of platelets // Semin. Hematol. 2001. Vol. 38, No. 2. P. 160–168. doi: 10.1016/s0037-1963(01)90049-6
  16. Kailashiy J. Platelet-derived microparticles analysis: Techniques, challenges and recommendations // Anal. Biochem. 2018. Vol. 546. P. 78–85. doi: 10.1016/j.ab.2018.01.030
  17. Сироткина О.В., Боганькова Н.А., Ласковец А.Б. и др. Иммунологические методы в оценке функциональной активности тромбоцитов у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями // Медицинская иммунология. 2010. Т. 12, № 3. С. 213–218. doi: 10.15789/1563-0625-2010-3-213-218
  18. Сироткина О.В., Ермаков А.И., Гайковая Л.Б. и др. Микрочастицы клеток крови у больных COVID-19 как маркер активации системы гемостаза // Тромбоз, гемостаз и реология. 2020. № 4. С. 35–40. doi: 10.25555/THR.2020.4.0943
  19. Li X., Cong H. Platelet-derived microparticles and the potential of glycoprotein IIb/IIIa antagonists in treating acute coronary syndrome // Tex. Heart Inst. J. 2009. Vol. 36, No. 2. P. 134–139.
  20. Вавилова Т.В., Сироткина О.В., Ермаков А.И. и др. Молекулярные механизмы активации гемостаза при COVID-19 на госпитальном этапе // Лабораторная служба. 2021. Т. 10, № 4. С. 25–29. doi: 10.17116/labs20211004125
  21. Сироткина О.В., Ермаков А.И., Жиленкова Ю.И. и др. Динамика образования микровезикул клеток крови у больных COVID-19 на разных стадиях заболевания // Профилактическая и клиническая медицина. 2021. Т. 4, № 81. С. 68–74. doi: 10.47843/2074-9120_2021_4_68

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Показатель степени агрегации тромбоцитов в присутствии аденозиндифосфата (20 мкмоль/л). Уровень статистической значимости р < 0,0001. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ — двойная антиагрегантная терапия

Скачать (57KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Показатель экспрессии Р-селектина (процент тромбоцитов, позитивных по CD62Р-РЕ) в присутствии аденозиндифосфата (20 мкмоль/л). Уровень статистической значимости р < 0,0001. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ —двойная антиагрегантная терапия

Скачать (66KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Сравнительный анализ микрочастиц тромбоцитарного происхождения (CD9+CD41+) у пациентов и здоровых добровольцев. Уровень статистической значимости р = 0,003 для COVID-19 против ОЗАНК, р = 0,005 для COVID-19 против контроля. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ —двойная антиагрегантная терапия

Скачать (70KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2023



Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».