Актуальные вопросы стандартизации листьев алоэ древовидного (Aloe arborescens Mill.)

Обоснование. Листья алоэ древовидного (Aloe arborescens Mill.) содержат в своем составе целый комплекс биологически активных соединений (производные антрахинона, антрона, пирона, биополимеры и др.), их широко применяют в медицинской практике в качестве сырья для получения противовоспалительных и ранозаживляющих средств. Наличие в составе листьев антраценпроизводных обусловливает слабительную активность сырья и препаратов, что подчеркивает особую значимость препаратов алоэ древовидного для внутреннего применения при воспалительных заболеваниях, сопровождающихся запорами и снижением секреторной активности. Другим биологически активным соединением, с которым может быть связана противовоспалительная активность листьев алоэ, является производное пирона — алоэнин. В то же время, несмотря на широкое применение в медицине и изученность химического состава, остаются актуальными проблемы в области стандартизации сырья и препаратов алоэ древовидного. Описанные в литературе методики определения количественного содержания антраценпроизводных многостадийны, предусматривают предварительный кислотный гидролиз в сочетании с окислением, жидкость-жидкостную экстракцию образовавшихся агликонов и комплексообразование с ацетатом магния. В утвержденной нормативной документации на сырье и препараты алоэ не предусмотрено количественное определение алоэнина.

Цель — разработка методов определения количественного содержания биологически активных соединений в сырье и препаратах свежих листьев алоэ древовидного с использованием спектрофотометрического метода и метода высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Материалы и методы. Объектами исследования были свежие листья Aloe arborescens Mill., полученный ex tempore сок из свежих листьев алоэ древовидного. Образцы сырья собирали летом и осенью 2020 г. в Зимнем саду кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета. Индивидуальные вещества выделяли методом колоночной хроматографии. В исследовании использовали приборы Bruker DRX 500 (126,76 МГц) для определения спектров ЯМР ¹³С, Bruker AM 300 (300 МГц) — для определения спектров ЯМР ¹Н. Масс-спектры снимали на масс-спектрометре Kratos MS-30, регистрацию УФ-спектров проводили с помощью спектрофотометра Specord 40 (Analytik Jena). ВЭЖХ-анализ осуществляли с использованием хроматографа «Милихром-6» (НПАО «Научприбор»).

Результаты. В результате проведенных исследований из листьев алоэ древовидного методом колоночной хроматографии выделены алоэнин и смесь алоинов А и В (барбалоин). Разработана методика определения количественного содержания алоэнина методом микроколоночной обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектированием (306 нм), подвижная фаза — ацетонитрил: 1 % раствор уксусной кислоты в воде в соотношении 25 : 75, скорость элюирования — 100 мкл/мин. Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в свежих листьях алоэ древовидного (дифференциальная спектрофотометрия с щелочно-аммиачным раствором при 412 нм). Подобраны оптимальные условия экстракции: экстрагент — 40 % этилового спирта, экстракция в течение 60 мин при соотношении сырье/экстрагент 1 : 50. Валидационный анализ показал, что разработанные методики характеризуются удовлетворительными метрологическими показателями.

Заключение. Полученные результаты могут быть использованы при обновлении фармакопейной статьи «Алоэ древовидного листья свежие».