Влияние нейтрофилов и их экзопродуктов на биомассу биопленки, жизнеспособность бактерий и конъюгативный перенос в клетки Escherichia Coli

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель данного исследования — изучить влияние нейтрофилов и их антимикробных факторов, перекиси водорода и дефензина α, на биомассу биопленки, жизнеспособность входящих в нее бактерий и эффективность конъюгативного переноса плазмиды pOX38:Cm от штамма E. coli N4i pOX38:Cm в разные штаммы E. coli (комменсальный К12 TG1 и уропатогенные DL82, R32, R45). Массивность биопленки реципиента E. coli К12 TG1 с донором E. coli N4i pOX38:Cm увеличивалась при добавлении нейтрофилов в концентрации 10⁵ кл/мл по сравнению с контролем, в то время как биомасса биопленки снижалась у уропатогенных штаммов E. coli DL82/E. coli R45 c донором с 10⁶/10⁴–10⁶ кл/мл нейтрофилов, соответственно. Выживаемость реципиентов E. coli К12 TG1 и трансконъюгантов в биопленке была выше при добавлении всех концентраций нейтрофилов по сравнению с контролем. Действие 0,1 мМ H₂O₂ увеличивало показатель биомассы биопленки E. coli DL82 и E. coli R45, а концентрации 0,5 мМ для DL82 и 0,5 мМ, 2,5 мМ для R45 снижали биомассу биопленки бактерий в составе конъюгативной смеси. Частота конъюгативного переноса плазмиды pOX38:Cm была ниже в присутствии 2,5 мМ H₂O₂ в биопленке N4i pOX38:Cm × DL82, а также в присутствии 0,5 и 2,5 мМ H₂O₂ в биопленке N4i pOX38:Cm × R45 по сравнению с контролем. Частота конъюгации от донора E. coli N4i pOX38:Cm в E. coli DL82 снижалась при добавлении 5 или 25 нг/мл дефензина α, а частота конъюгации в биопленке N4i pOX38: Cm × R45 снижалась при добавлении 5 нг/мл, тогда как при добавлении 25 нг/мл — увеличивалась.

Об авторах

Ирина Леонидовна Масленникова

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук

Автор, ответственный за переписку.
Email: I.Maslennikova1974@gmail.com

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунорегуляции

Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13

И. В. Некрасова

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук

Email: I.Maslennikova1974@gmail.com

кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунорегуляции

Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13

Эрьявец М. Старчич

Люблянский университет

Email: I.Maslennikova1974@gmail.com

кандидат биологических наук, профессор кафедры микробиологии биотехнического факультета

Словения, Любляна

М. В. Кузнецова

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук

Email: I.Maslennikova1974@gmail.com

доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной биотехнологии Института экологии и генетики микроорганизмов

Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13

Список литературы

  1. Данилов В.С., Зарубина А.П., Ерошников Г.Е., Соловьева Л.Н., Завильгельский Г.Б. Сенсорные биолюминесцентные системы на основе lux-оперонов разных видов бактерий // Вестник Московского университета. Серия 16. Биология. 2002. Т. 3. С. 20–24. [Danilov V.S., Zarubina A.P., Erochnikov G.E., Solov’eva L.N., Kartashev F.V., Zavil’gel’skii G.B. Sensory bioluminescence systems based on lux-operons of various-type luminescent bacteria. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya = Herald of Moscow University. Series 16. Biology, 2002, vol. 3, pp. 20–24. (In Russ.)]
  2. Abdesselem M., Pétri N., Kuhner R., Mousseau F., Rouffiac V., Gacoin T., Laplace-Builhé C., Alexandrou A., Bouzigues C.I. Real-time in vivo ROS monitoring with luminescent nanoparticles reveals skin inflammation dynamics. Biomed Opt. Express. 2023, vol. 14, no. 10, pp. 5392–5404. doi: 10.1364/BOE.501914
  3. Bolatchiev A. Antibacterial activity of human defensins against Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Peer J., 2020, vol. 8: e10⁴55. doi: 10.7717/peerj.10⁴55
  4. Burmølle M., Bahl M.I., Jensen L.B., Sørensen S.J., Hansen L.H. Type 3 fimbriae, encoded by the conjugative plasmid pOLA52, enhance biofilm formation and transfer frequencies in Enterobacteriaceae strains. Microbiology (Reading), 2008, vol. 154, no. pt 1, pp. 187–195. doi: 10.1099/mic.0.2007/010⁴54-0
  5. Flores-Mireles A.L., Walker J.N., Caparon M., Hultgren S.J. Urinary tract infections: epidemiology, mechanisms of infection and treatment options. Nat. Rev. Microbiol., 2015, vol. 13, no. 5, pp. 269–284. doi: 10.1038/nrmicro3432
  6. Guglielmini J., Quintais L., Garcillán-Barcia M.P., de la Cruz F., Rocha E.P. The repertoire of ICE in prokaryotes underscores the unity, diversity, and ubiquity of conjugation. PLoS Genet., 2011, vol. 8: e1002222. doi: 10.1371/journal.pgen.1002222
  7. Hirschfeld J. Dynamic interactions of neutrophils and biofilms. J. Oral Microbiol., 2014, vol. 6: 26102. doi: 10.3402/jom.v6.26102
  8. Kuznetsova M.V., Maslennikova I.L., Pospelova J.S., Žgur Bertok D., Starčič Erjavec M. Differences in recipient ability of uropathogenic Escherichia coli strains in relation with their pathogenic potential. Infect. Genet. Evol., 2022, vol. 97: 10⁵160. doi: 10.1016/j.meegid.2021.10⁵160
  9. Lila A.S.A., Rajab A.A.H., Abdallah M.H., Rizvi S.M.D., Moin A., Khafagy E.S., Tabrez S., Hegazy W.A.H. Biofilm Lifestyle in Recurrent Urinary Tract Infections. Life (Basel), 2023, vol. 13, no. 1: 148. doi: 10.3390/life13010148
  10. Maslennikova I.L., Nekrasova I.V., Kuznetsova M.V. Interaction of neutrophils and biofilm formed by uropathogenic Escherichia coli strains with different pathogenic potential. Bull. Exp. Biol. Med., 2022, vol. 174, no. 1, pp. 51–56. doi: 10.1007/s10⁵17-022-05647-4
  11. Michaelis C., Grohmann E. Horizontal gene transfer of antibiotic resistance genes in biofilms. Antibiotics (Basel), 2023, vol. 12, no. 2: 328. doi: 10.3390/antibiotics12020328
  12. Moazzezy N., Asadi Karam M.R., Rafati S., Bouzari S., Oloomi M. Inhibition and eradication activity of truncated α-defensin analogs against multidrug resistant uropathogenic Escherichia coli biofilm. PLoS One, 2020, vol. 15, no. 7: e0235892. doi: 10.1371/journal.pone.0235892
  13. Németh B.C., Várkonyi T., Somogyvári F., Lengyel C., Fehértemplomi K., Nyiraty S., Kempler P., Mándi Y. Relevance of α-defensins (HNP1-3) and defensin β-1 in diabetes. World J. Gastroenterol., 2014, vol. 20, no. 27, pp. 9128–9137. doi: 10.3748/wjg.v20.i27.9128
  14. Oliveira A., Sousa J.C., Silva A.C., Melo L.D.R., Sillankorva S. Chestnut honey and bacteriophage application to control Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli biofilms: Evaluation in an ex vivo wound model. Front. Microbiol., 2018, vol. 9: 1725. doi: 10.3389/fmicb.2018.01725
  15. Olson P.D., Hunstad D.A. Subversion of Host Innate Immunity by Uropathogenic Escherichia coli. Pathogens, 2016, vol. 5, no. 1: 2. doi: 10.3390/pathogens5010002
  16. O’Toole G., Kaplan H.B., Kolter R. Biofilm formation as microbial development. Annu. Rev. Microbiol., 2000, vol. 54, pp. 49–79. doi: 10.1146/annurev.micro.54.1.49
  17. Robinson A.E., Heffernan J.R., Henderson J.P. The iron hand of uropathogenic Escherichia coli: the role of transition metal control in virulence. Future Microbiol., 2018, vol. 13, no. 7, pp. 745–756. doi: 10.2217/fmb-2017-0295
  18. Rodríguez-Beltrán J., DelaFuente J., León-Sampedro R., MacLean R.C., San Millán Á. Beyond horizontal gene transfer: the role of plasmids in bacterial evolution. Nat. Rev. Microbiol., 2021, vol. 9, no. 6, pp. 347–359. doi: 10.1038/s41579-020-00497-1
  19. Wang Z., Humphrey C., Frilot N., Wang G., Nie Z., Moniri N.H., Daaka Y. Dynamin2-and endothelial nitric oxide synthase-regulated invasion of bladder epithelial cells by uropathogenic Escherichia coli. J. Cell. Biol., 2011, vol. 192, no. 1, pp. 101–110. doi: 10.10⁸3/jcb.201003027
  20. Watson J.R., Hains D.S., Cohen D.M., Spencer J.D., Kline J.M., Yin H., Schwaderer A.L. Evaluation of novel urinary tract infection biomarkers in children. Pediatr. Res., 2016, vol. 79, no. 6, pp. 934–939. doi: 10.1038/pr.2016.33

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок 1. Биомасса биопленок (А) и выживаемость реципиентов E. coli K12 TG1, DL82, R32, R45 (R), донора E. coli N4i pOX38:Cm (D), трансконъюгантов (Т) (Б) в конъюгативной смеси в присутствие нейтрофилов (PMN)

3. Рисунок 2. Частота конъюгации комменсального E. coli K12 TG1, уропатогенных штаммов E. coli (DL82, R32, R45) с донором E. coli N4i pOX38 (D) в присутствие нейтрофилов (PMN)

Скачать (534KB)
4. Рисунок 3. Биомасса биопленок (А) и выживаемость реципиентов E. coli DL82, R45 (R), донора E. coli N4i pOX38 (D), трансконъюгантов (Т) (Б) в конъюгативной смеси в присутствии перекиси водорода

Скачать (537KB)
5. Рисунок 4. Частота конъюгации уропатогенных штаммов E. coli (DL82, R45) с донором E. coli N4i pOX38 (D) в присутствие перекиси водорода

Скачать (260KB)
6. Рисунок 5. Выживаемость реципиентов E. coli DL82, R45 (R), донора E. coli N4i pOX38 (D), трансконъюгантов (Т) в конъюгативной смеси (А) и частота конъюгации (Б) в присутствии дефензина α

Скачать (543KB)

© Масленникова И.Л., Некрасова И.В., Старчич Э.М., Кузнецова М.В., 2024

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».