Оценка уровня вируснейтрализующих антител, индуцированных новой коронавирусной инфекцией COVID-19: Разработка анализа быстрой оценки протективных антител с использованием реакции на основе псевдовируса
- Авторы: Фунтиков А.А.1, Литвинова Н.А.1, Зуев Е.В.2, Кулемзин С.В.3, Шукуров Р.Р.2
-
Учреждения:
- АО "ГЕНЕРИУМ"
- АО «ГЕНЕРИУМ»
- ООО «ИМГЕН+»
- Выпуск: Том 13, № 3 (2023)
- Страницы: 457-468
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
- URL: https://bakhtiniada.ru/2220-7619/article/view/133196
- DOI: https://doi.org/10.15789/2220-7619-EOV-4336
- ID: 133196
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Постоянное появление новых вариантов SARS-CoV-2 со свойствами ускользания от иммунного ответа, таких как Delta (B.1.617.2) и Omicron (B.1.1.529), ставит под сомнение степень опосредованного антителами иммунного ответа на вирус. Наличие вируснейтрализующих антител (ВНА) против SARS-CoV-2 в сыворотке крови переболевших и иммунизированных добровольцев является наиболее точным показателем уровня протективной активности. Для доклинических и клинических исследований вакцин необходимы высокочувствительные методы надежного и быстрого обнаружения ВНА против SARS-CoV-2. Кроме того, количественная оценка ВНА у переболевших COVID-19 субъектов может быть полезна для выявления потенциальных доноров для пассивной иммунизации и терапевтического применения иммуноглобулинов класса G. Псевдовирусы активно применяются в качестве альтернативы инфекционным вирусным изолятам I–II групп патогенности в серологических исследованиях для определения титров нейтрализующих антител, образующихся у вакцинированных или инфицированных добровольцев. Используя несколько псевдотипов с различными репортерными генами, возможно одновременное выявление антител к различным типам вирусов в одном биологическом образце. В настоящее время широко применяется псевдолентивирусная система, в которой псевдовирусные частицы получаются методом трансфекции клеток-продуцентов векторами мультиплазмидной системы из 4–5 плазмид: одна для векторного генома, вторая — для Gag-Pol, третья — для Rev, еще одна или две — для белка(ов) оболочки или для коэкспрессии меченого вирусного белка, как GAG-GFP или VPR-GFP, основным преимуществом которой является безопасность, обусловленная минимальным риском образования репликационно-компетентного вируса. В статье рассматривается разработка методики, позволяющей определить наличие вирусспецифических вируснейтрализующих антител к антигену SARS-CoV-2 в сыворотке крови добровольцев, переболевших новой коронавирусной инфекцией COVID-19 и/или иммунизированных препаратами специфической профилактики здоровых добровольцев в реакции нейтрализации на культуре клеток НЕК 293-T-hAce2 с применением псевдотипированных вирусных конструкций на основе вируса иммунодефицита человека. Показаны результаты разработки и валидации метода, перспективы его дальнейшего использования.
Ключевые слова
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Андрей Александрович Фунтиков
АО "ГЕНЕРИУМ"
Email: aafuntikov@generium.ru
кандидат ветеринарных наук, научный сотрудник
Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, поселок Вольгинский, улица Владимирская, стр. 14Наталия Алексеевна Литвинова
АО "ГЕНЕРИУМ"
Автор, ответственный за переписку.
Email: litvinova@ibcgenerium.ru
руководитель отдела, кандидат биологических наук
Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, поселок Вольгинский, улица Владимирская, стр. 14Евгений Васильевич Зуев
АО «ГЕНЕРИУМ»
Email: evzuev@generium.ru
старший научный сотрудник
Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, поселок Вольгинский, улица Владимирская, стр. 14Сергей Владимирович Кулемзин
ООО «ИМГЕН+»
Email: skulemzin@mcb.nsc.ru
кандидат биологических наук, научный сотрудник
Россия, НовосибирскРахим Рахманкулыевич Шукуров
АО «ГЕНЕРИУМ»
Email: Shukurov@ibcgenerium.ru
кандидат биологических наук, директор департамента фармацевтического анализа
Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, поселок Вольгинский, улица Владимирская, стр. 14Список литературы
- Beeching N.J., Fletcher T.E., Fowler R. Coronavirus Disease (COVID-19). BMJ Best Practices. URL: http://www.hpruezi.nihr.ac.uk/publications/2020/bmj-best-practice-coronavirus-disease-covid-19 (23.01.2023)
- Campi-Azevedo A.C., Peruhype-Magalhāes V., Coelho-Dos-Reis J.G., Antonelli L.R., Costa-Pereira C., Speziali E., Reis L.R., Lemos J.A., Ribeiro J.G.L., Bastos Camacho L.A., de Sousa Maia M.L., Barbosa de Lima S.M., Simões M., de Menezes Martins R., Homma A., Cota Malaquias L.C., Tauil P.L., Costa Vasconcelos P.F., Martins Romano A.P., Domingues C.M., Teixeira-Carvalho A., Martins-Filho O.A.; Collaborative Group for Studies of Yellow Fever Vaccine. 17DD yellow fever revaccination and heightened long-term immunity in populations of disease-endemic areas, Brazil. Emerg. Infect. Dis.,2019, vol. 25, no. 8, pp. 1511–1521. doi: 10.3201/eid2508.181432
- Chi X., Yan R., Zhang J., Zhang G., Zhang Y., Hao M., Zhang Z., Fan P., Dong Y., Yang Y., Chen Z., Guo Y., Zhang J., Li Y., Song X., Chen Y., Xia L., Fu L., Hou L., Xu J., Yu C., Li J., Zhou Q., Chen W. A neutralizing human antibody binds to the N-terminal domain of the Spike protein of SARS-CoV-2. Science,2020, vol. 369, no. 6504, pp. 650–655. doi: 10.1126/science.abc6952
- Cohen B.J., Audet S., Andrews N., Beeler J.; WHO working group on measles plaque reduction neutralization test. Plaque reduction neutralization test for measles antibodies: description of a standardised laboratory method for use in immunogenicity studies of aerosol vaccination. Vaccine,2007, vol. 26, no. 1, pp. 59–66. doi: 10.1016/j.vaccine.2007.10.046
- Cohen B.J., Doblas D., Andrews N. Comparison of plaque reduction neutralisation test (PRNT) and measles virus-specific IgG ELISA for assessing immunogenicity of measles vaccination. Vaccine,2008, vol. 26, no. 50, pp. 6392–6397. doi: 10.1016/j.vaccine.2008.08.074
- Duong D. Alpha, Beta, Delta, Gamma: What’s important to know about SARS-CoV-2 variants of concern? CMAJ,2021, vol. 193, no. 27, pp. E1059-E1060. doi: 10.1503/cmaj.1095949
- Eyal O., Olshevsky U., Lustig S., Paran N., Halevy M., Schneider P., Zomber G., Fuchs P. Development of a tissue-culture-based enzyme-immunoassay method for the quantitation of anti-vaccinia-neutralizing antibodies in human sera. J. Virol. Methods,2005, vol. 130, no. 1–2, pp. 15–21. doi: 10.1016/j.jviromet.2005.05.027
- Liu L., Wang P., Nair M.S., Yu J., Rapp M., Wang Q., Luo Y., Chan J.F., Sahi V., Figueroa A., Guo X.V., Cerutti G., Bimela J., Gorman J., Zhou T., Chen Z., Yuen K.Y., Kwong P.D., Sodroski J.G., Yin M.T., Sheng Z., Huang Y., Shapiro L., Ho D.D. Potent neutralizing antibodies against multiple epitopes on SARS-CoV-2 spike. Nature,2020, vol. 584, no. 7821, pp. 450–456. doi: 10.1038/s41586-020-2571-7
- Nie J., Li Q., Wu J., Zhao C., Hao H., Liu H., Zhang L., Nie L., Qin H., Wang M., Lu Q., Li X., Sun Q., Liu J., Fan C., Huang W., Xu M., Wang Y. Quantification of SARS-CoV-2 neutralizing antibody by a pseudotyped virus-based assay. Nat. Protoc.,2020, vol. 15, no. 11, pp. 3699–3715. doi: 10.1038/s41596-020-0394-5
- Rogers T.F., Zhao F., Huang D., Beutler N., Burns A., He W.T., Limbo O., Smith C., Song G., Woehl J., Yang L., Abbott R.K., Callaghan S., Garcia E., Hurtado J., Parren M., Peng L., Ramirez S., Ricketts J., Ricciardi M.J., Rawlings S.A., Wu N.C., Yuan M., Smith D.M., Nemazee D., Teijaro J.R., Voss J.E., Wilson I.A., Andrabi R., Briney B., Landais E., Sok D., Jardine J.G., Burton D.R. Isolation of potent SARS-CoV-2 neutralizing antibodies and protection from disease in a small animal model. Science,2020, vol. 369, no. 6506, pp. 956–963. doi: 10.1126/science.abc7520
- Tang X., Wu C., Li X., Song Y., Yao X., Wu X., Duan Y., Zhang H., Wang Y., Qian Z., Cui J., Lu J. On the origin and continuing evolution of SARS-CoV-2. Natl Sci. Rev.,2020, vol. 7, no. 6, pp. 1012–1023. doi: 10.1093/nsr/nwaa036
- Yun S., Ryu J.H., Jang J.H., Bae H., Yoo S.H., Choi A.R., Jo S.J., Lim J., Lee J., Ryu H., Cho S.Y., Lee D.G., Lee J., Kim S.C., Park Y.J., Lee H., Oh E.J. Comparison of SARS-CoV-2 antibody responses and seroconversion in COVID-19 patients using twelve commercial immunoassays. Ann. Lab. Med.,2021, vol. 41, no. 6, pp. 577–587. doi: 10.3343/alm.2021.41.6.577
- Zhao H., Zhu Q., Zhang C., Li J., Wei M., Qin Y., Chen G., Wang K., Yu J., Wu Z., Chen X., Wang G. Tocilizumab combined with favipiravir in the treatment of COVID-19: a multicenter trial in a small sample size. Biomed. Pharmacother.,2021, vol. 133: 110825. doi: 10.1016/j.biopha.2020.110825.
Дополнительные файлы
