Age differences in the leukocyte blood composition of the common viper Vipera berus (Reptilia: Serpentes: Viperidae)
- 作者: Romanova E.B.1, Solomaykin E.I.1, Bakiev A.G.2, Gorelov R.A.2
-
隶属关系:
- Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod
- Institute of Ecology of the Volga River Basin of Russian Academy of Sciences
- 期: 卷 23, 编号 1-2 (2023)
- 页面: 44-51
- 栏目: Articles
- URL: https://bakhtiniada.ru/1814-6090/article/view/257345
- DOI: https://doi.org/10.18500/1814-6090-2023-23-1-2-44-51
- EDN: https://elibrary.ru/OXEWAX
- ID: 257345
如何引用文章
全文:
详细
The results of our comparative analysis of parameters of the leukocyte blood system of underyearlings and mature specimens of the common viper Vipera berus are presented. The material was the blood of 36 females and 26 males caught in the Middle Volga basin, and 13 underyearlings born in captivity from 4 females of this sample. V. b. berus underyearlings differed: from the females by a lower content of heterophils and azurophils, an increased content of eosinophils and basophils, an increase in the leukocyte shift index, a decrease in the lymphocytic–granulocytic index, the index of the of heterophil–eosinophil ratio, the index of the lymphocyte–eosinophil ratio; from the males by a reduced content of heterophils, an increased content of eosinophils and basophils, an increase in the leukocyte shift index, the index of the heterophil–eosinophil ratio, and the index of the lymphocyte–eosinophil ratio. In general, the adaptive response of the blood system of underyearlings indicated the later activation of lymphocytes as an effector link and the imbalance of the immune response due to the lack of a resource of immunocompetent cells (agranulocytes) compared with the indices of adults from natural populations.
全文:
ВВЕДЕНИЕ
Разрушение биоразнообразия идет по трем основным компонентам: генам, видам и экосистемам (Бродский, Сафронова, 2017), что ведет к утрате биологических ценных ресурсов, к которым относят ядовитых змей. Эти пресмыкающиеся имеют важное значение в качестве ядопродуцентов для медицины. Все наземные ядовитые змеи фауны России относятся к гадюковым змеям (Ананьева, Орлов, 2005). В адаптации гадюковых змей к изменяющимся условиям среды, возникающим при воздействие экстремальных естественных и антропогенных факторов, самым непосредственным образом участвует ключевая гомеостатическая иммуногематологическая система, определяющая резистентность и устойчивость организма (Хайрутдинов, Соколина, 2010; Павлов, 2019; Романова и др., 2017). При значительном объеме исследований по экологической физиологии ограничены работы по возрастным особенностям системы крови (Павлов, 1998; Романова и др., 2018) и фрагментарны данные по анализу адаптивных реакций системы крови гадюковых змей разных локалитетов в зависимости от видовой, половой и возрастной принадлежности. Ранее проведенными исследованиями выявлены незначительные различия лейкоцитарного профиля крови самок и родившихся от них в условиях серпентария сеголетков гадюк Vipera berus berus (Linnaeus, 1758) и V. b. nikolskii Vedmederja, Grubant et Rudaeva, 1986 (Романова и др., 2018). Находясь в неволе, в условиях, значительно отличающихся от привычной среды обитания, дикие животные испытывают значительный стресс, и нам представляется актуальным провести сравнительный анализ приспособительной изменчивости важнейшей иммуногематологической системы организма сеголетков по сравнению с половозрелыми особями природной популяции гадюки обыкновенной.
Цель настоящей работы – сравнительный анализ лейкоцитарного профиля крови взрослых особей гадюки обыкновенной Vipera berus (Linnaeus, 1758), обитающих в естественных условиях лесопарковой городской зоны Самары, и молодых особей этого вида, родившихся в неволе.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обыкновенных гадюк Vipera b. berus (Linnaeus, 1758) (62 особи: самцы – 26, самки – 36) из природной популяции отловили в Красноглинском районе г. Самара в 2014 – 2015 гг. В 2014 г. отловили 19 самцов и 30 самок, в 2015 г. – 7 и 2 соответственно. Беременные самки этой популяции (4 особи) были добыты 15 – 20 июля 2017 г., и в условиях серпентария Института экологии Волжского бассейна РАН (г. Тольятти) они принесли потомство (13 особей).
Для получения образцов крови животных обездвиживали путём захвата и делали пункцию верхнечелюстной вены для взятия крови и приготовления мазков. Дифференцированный подсчёт лейкоцитов проводили с иммерсией (×1500) после фиксации и окрашивания препаратов по Романовскому – Гимзе. С учетом морфологических особенностей определяли шесть типов лейкоцитарных клеток (в %): гранулоциты (гетерофилы, базофилы, эозинофилы) и мононуклеарные клетки (агранулоциты): азурофилы, моноциты, лимфоциты (Хайрутдинов, Соколина, 2010; Павлов, 2019; Campbell, 2006). На основании лейкоцитарной формулы крови были рассчитаны интегральные лейкоцитарные индексы (отн. ед): индекс сдвига лейкоцитов (ИСЛ); индекс соотношения лимфоцитов/эозинофилов (ИСЛЭ); индекс соотношения гетерофилов/эозинофилов (ИСГЭ); лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ); индекс соотношения гетерофилов/лимфоцитов (ИСГЛ).
Критериями согласия оценивали нулевую гипотезу о соответствии анализируемых показателей нормальному распределению. С учетом вида распределения центральные тенденции и рассеяние изученных показателей описывали медианой (Ме) и интерквартильным размахом (IQR) (значения 25-го и 75-го процентилей). Анализ данных проводили методами непараметрической статистики с расчетом критериев: медианного (82), Краскела – Уоллиса (H) (при сравнении нескольких независимых групп по одному признаку); Данна (z) (при попарном сравнении групп). Все расчеты, построение ординационных диаграмм проводили с использованием пакетов программ Microsoft Excel 2013, STATISTICA 8 (Реброва, 2006; Халафян, 2007). За величину уровня статистической значимости принимали α = 0.05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Опубликованные данные по различию в составе лейкоцитов у самцов и самок обыкновенной гадюки из Пермского края неоднозначны (Воробьева, 2007; Ганщук и др., 2008). На наших выборках из лесопарковой городской зоны г. Самара статистически значимых половых различий по лейкоцитарному составу крови в 2014 и 2015 гг. мы не выявили (табл. 1).
Таблица 1. Лейкоцитарный состав периферической крови самцов и самок Vipera berus из г. Самара
Table 1. Leukocyte composition of the peripheral blood of males and females of Vipera berus from Samara Cit
Показатель лейкограммы / Leukogram indicators | Самцы / Males | Самки / Females | Критерий Манна - Уитни (и, р) / Mann- Whitney test (и, р) | ||
Me | IQR | Me | IQR | ||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
2014 | |||||
Лейкоцитарная формула крови, % / WBC (white blood cells), % | |||||
Гетерофилы / Heterophils | 9.00 | 5.00 | 8.50 | 4.00 | 0.09, 0.92 |
Эозинофилы / Eosinophils | 9.00 | 3.00 | 8.00 | 3.00 | 0.58, 0.55 |
Базофилы / Basophils | 5.00 | 5.00 | 4.00 | 4.00 | 0.41,0.68 |
Азурофилы / Azurophils | 12.00 | 5.00 | 13.00 | 5.00 | 1.24, 0.21 |
Моноциты / Monocytes | 7.00 | 4.00 | 7.00 | 5.00 | 0.22, 0.82 |
Лимфоциты / Lymphocytes | 61.00 | 6.00 | 60.5 | 90.00 | 0.11,0.91 |
Суммарное содержание клеток, % / Total cell count from all white cells, % | |||||
Гранулоциты / Granulocytes | 22.00 | 6.00 | 20.00 | 5.00 | 0.77, 0.43 |
Агранулоциты /Agranulocytes | 78.00 | 6.00 | 80.00 | 5.00 | 0.78. 0.44 |
Лейкоцитарные индексы, отн. ед. / Leukocyte indices, arb. un. | |||||
ИСЛ / Leukocyte shift index | 0.28 | 0.09 | 0.25 | 0.07 | 0.78, 0.44 |
ИСЛЭ / Index of the lymphocytes and eosinophils ratio | 6.77 | 14.37 | 7.71 | 11.50 | 0.78, 0.44 |
ИСГЭ / Index of the heterophils and eosinophils ratio | 1.20 | 0.88 | 1.19 | 4.00 | 1.89, 037 |
ИЛГ / Lymphocyte - granulocyte index | 28.18 | 9.69 | 29.27 | 13.23 | 1.26, 0.20 |
ИСГЛ / Index of the heterophils and lymphocytes ratio | 0.15 | 0.09 | 0.14 | 0.08 | 0.24, 080 |
2015 | |||||
Лейкоцитарная формула крови, % / WBC (white blood cells), % | |||||
Гетерофилы / Heterophils | 8.00 | 4.50 | 9.00 | 5.00 | 0.22, 0.82 |
Эозинофилы / Eosinophils | 7.00 | 2.00 | 6.00 | 6.00 | 0.02, 0.97 |
Базофилы / Basophils | 8.50 | 9.00 | 8.00 | 13.00 | 0.27, 0.78 |
Азурофилы / Azurophils | 10.00 | 4.00 | 9.00 | 5.00 | 0.63, 0.52 |
Моноциты / Monocytes | 10.50 | 4.00 | 9.00 | 4.00 | 0.52, 0.59 |
Лимфоциты / Lymphocytes | 52.50 | 9.50 | 54.00 | 7.00 | 0.69, 0.48 |
Суммарное содержание клеток, % / Total cell count from all white cells, % | |||||
Гранулоциты / Granulocytes | 25.00 | 8.00 | 25.00 | 13.00 | 0.02, 0.97 |
Агранулоциты / Agranulocytes | 75.00 | 8.00 | 75.00 | 13.00 | 0.02, 0.97 |
Лейкоцитарные индексы, отн. ед. / Leukocyte indices, arb. un. | |||||
ИСЛ / Leukocyte shift index | 0.33 | 0.14 | 0.33 | 0.24 | 0.02, 0.98 |
ИСЛЭ / Index of the lymphocytes and eosinophils ratio | 6.68 | 5.78 | 7.00 | 16.26 | 0.19, 0.84 |
ИСГЭ / Index of the heterophils and eosinophils ratio | 0.86 | 0.91 | 0.75 | 2.42 | 0.13, 0.88 |
ИЛГ / Lymphocyte - granulocyte index | 21.96 | 9.82 | 22.40 | 11.73 | 0.19, 0.84 |
ИСГЛ / Index of the heterophils and lymphocytes ratio | 0.15 | 0.09 | 0.18 | 0.08 | 0.02, 0.97 |
Примечание. Me - медиана, IQR - интерквартильный размах. Note. Me - median, IQR - interquartile range.
Картина крови сеголетков V. berus представлена в табл. 2.
Таблица 2. Лейкоцитарный состав периферической крови сеголетков Vipera berus в условиях серпентария
Table 2. Peripheral blood leukocyte composition of Vipera berus underyearlings under serpentarium conditions
Показатель лейкограммы / Leukogram indicators | Me | IQR |
Лейкоцитарная формула крови, % / WBC (white blood cells), % | ||
Гетерофилы / Heterophils | 6.00 | 5.00 |
Эозинофилы / Eosinophils | 12.00 | 3.00 |
Базофилы / Basophils | 10.00 | 5.00 |
Азурофилы / Azurophils | 8.00 | 4.00 |
Моноциты / Monocytes | 6.00 | 3.00 |
Лимфоциты / Lymphocytes | 59.00 | 17.00 |
Суммарное содержание клеток, % / Total cell count from all white cells, % | ||
Гранулоциты / Granulocytes | 27.00 | 10.00 |
Агранулоциты /Agranulocytes | 73.00 | 10.00 |
Лейкоцитарные индексы, отн. ед. / Leukocyte indices, arb. un. | ||
ИСЛ / Leukocyte shift index, arb. un. | 0.36 | 0.19 |
ИСЛЭ / Index of the lymphocytes and eosinophils ratio | 4.87 | 2.39 |
ИСГЭ / Index of the heterophils and eosinophils ratio | 0.33 | 0.44 |
ИЛГ / Lymphocyte - granulocyte index | 23.60 | 12.59 |
ИСГЛ / Index of the heterophils and lymphocytes ratio | 0.10 | 0.10 |
Примечание. Me - медиана, IQR - интерквартильный размах. Note. Me - median, IQR - interquartile range.
Лейкоцитарный профиль крови сеголетков V. berus имел выраженные различия с гранулоцитарной составляющей лейкоцитарного профиля крови взрослых особей гадюки обыкновенной, обитающих в естественных условиях лесопарковой городской зоны г. Самара. Критерий Краскела – Уоллиса (Н) и медианный тест (82) подтвердили принадлежность исследованных выборок к разным генеральным совокупностям и статистически значимое различие в лейкоцитарных показателях крови сеголетков и взрослых особей гадюки обыкновенной (табл. 3).
Таблица 3. Сравнительный анализ лейкоцитарного состава крови сеголетков (серпентарий) и взрослых особей Vipera berus из природной популяции (г. Самара, Красноглинский район)
Table 3. Comparative analysis of the blood leukocyte composition of Vipera berus underyearlings (serpentarium) and adults from the natural population (Samara region, Krasnoglinsky district)
Лейкоциты, % / Leukocyte, % | H | P |
| P | Самцы / Males | Самки / Females | ||
| P | z | P | |||||
Лейкоцитарная формула крови / WBC (white blood cells) | ||||||||
Гетерофилы / Heterophils | 12.28 | 0.01 | 10.35 | 0.03 | 2.92 | 0.03 | 3.07 | 0.02 |
Эозинофилы / Eosinophils | 21.02 | 0.0003 | 15.20 | 0.004 | 4.30 | 0.01 | 3.87 | 0.01 |
Базофилы / Basophils | 38.57 | <0.001 | 28.91 | <0.001 | 3.92 | 0.0008 | 4.56 | 0.00005 |
Азурофилы / Azurophils | 18.96 | 0.0008 | 11.25 | 0.02 | 2.67 | 0.07 | 3.82 | 0.001 |
Моноциты / Monocytes | 22.44 | 0.0002 | 16.58 | 0.0023 | 0.69 | 1.00 | 1.04 | 1.00 |
Лимфоциты / Lymphocytes | 16.34 | 0.0026 | 17.52 | 0.0015 | 1.03 | 1.00 | 0.94 | 1.00 |
Примечание. Н - критерий Краскела - Уоллиса, х2 - медианный критерий, z - критерий Данна, р - уровень значимости. Жирным шрифтом выделены статистически значимые различия.
Note. Н-Kruskel-Wallis ANOVA, х2 - median test, z - Dunn's test, р - significance level. Statistically significant differences appear in bold.
Апостериорное сравнение выборок с использованием критерия Данна с применением поправки Бонферрони при оценке значения р выявило в крови сеголетков повышенное содержание суммарных гранулоцитов, за счет повышения доли эозинофилов и базофилов, на фоне снижения числа гетерофилов по сравнению с самками и самцами. Отметим также снижение в крови сеголетков азурофилов по сравнению с самками.
Сдвиг лейкоцитарного профиля сеголетков особенно проявлялся в изменении всех интегральных индексов, кроме ИСГЛ. Отмечено возрастание ИСЛ (по отношению к самкам и самцам) и снижении ИЛГ (по отношению к самкам), что иллюстрировало активацию неспецифической защитной системы крови и отставание в реагировании лимфоцитов как эффекторного звена иммунного ответа организма, что подтверждалось снижением соотношения лимфоцитов/эозинофилов (ИСЛЭ) и гетерофилов/эозинофилов (ИСГЭ) в крови сеголетков (рис. 1).
Рис. 1. Возрастные различия в значениях интегральных индексов крови Vipera berus. * статистически значимые показатели
Для визуализации различий в лейкоцитарном профиле сеголетков и взрослых особей из той природной популяции, откуда были взяты беременные самки, мы воспользовались методом главных компонент. На основе интегральных лейкоцитарных показателей (сумма гранулоцитов, агранулоцитов, ИСЛ, ИСЛЭ, ИСГЭ, ИЛГ, ИСГЛ) выделили первые наиболее информативные главные компоненты и определили их факторные нагрузки. Первая главная компонента с собственным значением 52.38 объясняла 95.11% общей вариации (изменчивости). Вторая главная компонента для значения 2.42 описывала 4.4% оставшейся информации после выделения первой главной компоненты. В первую главную компоненту наибольший вклад вносили переменные: гранулоциты (сильная положительная корреляция), агранулоциты и лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс, ИЛГ (сильные отрицательные корреляции). Поэтому можно субъективно обозначить первую факторную ось как иллюстрацию сбалансированности иммунного ответа организма. Вторая факторная ось имела наиболее сильную отрицательную корреляцию с переменной ИСЛЭ и умеренную положительную – с ИЛГ. Относительный вклад переменной ИСЛЭ (0.69) в дисперсию факторной оси был выше вклада переменной ИСЛ (0.20).
Изъятые из природной популяции взрослые особи гадюки обыкновенной (самцы и самки) объединялись в общие группы: выборки 2014 г. занимали второй и третий квадрант; выборки 2015 г. – четвертый квадрант (рис. 2). При этом половая изменчивость в лейкоцитарном составе крови змей выражена незначительно. Выборка сеголетков располагалась в первом квадранте факторного пространства, что обусловливалось повышенным значением ИСЛ и пониженными значениями всех других индексов по сравнению со взрослыми особями. Таким образом, адаптивный ответ системы крови сеголетков гадюки обыкновенной характеризовался отставанием в реагировании на комплекс факторов серпентария и несбалансированностью иммунного ответа за счет недостаточности ресурса иммунокомпетентных клеток (агранулоцитов) по сравнению с показателями взрослых особей природной популяции.
Рис. 2. График рассеяния выборок Vipera berus в пространстве главных компонент (m – males, самцы; f – females, самки)
С другой стороны, невысокий показатель ИСГЛ, рассматриваемый как гематологический параметр стресса (Davis et al., 2008), свидетельствовал об адекватности физиологических механизмов адаптации, протекающих в организме рептилий в специфических условиях серпентария и отсутствии дополнительного стрессового воздействия.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Адаптивный ответ системы крови ядовитых змей к комплексу факторов естественной среды обитания реализуется за счет перераспределения соотношения в крови гетерофилов и лимфоцитов, обеспечивающих реакции иммунного реагирования (Павлов, 1998; Романова и др., 2017; Campbell, 2006; Davis et al., 2008; Arican, Cicek, 2010). В естественной среде обитания в процессе адаптации организма змей изменяются показатели клеточной и гуморальной защиты и сильнее выражены неспецифические иммунные ответы по сравнению с адаптивными реакциями иммунитета, что отражается на морфологическом составе крови.
В условиях серпентария адаптивный ответ системы крови сеголетков гадюки обыкновенной характеризовался отставанием в реагировании на комплекс факторов среды и несбалансированностью иммунного ответа за счет недостаточности ресурса иммунокомпетентных клеток (агранулоцитов) по сравнению с показателями взрослых особей гадюки обыкновенной, обитающих в естественных условиях лесопарковой городской зоны. Отметим, что экологический подход к исследованию ядовитых животных органично интегрирует в себе специфику их биологии (морфологию, распространение, сезонную и суточную активность, питание и др.) и продуцируемых ядов как химических веществ, участвующих в межвидовых (аллелохимических) взаимодействиях (Гелашвили и др., 2015). Логично полагать, что адаптационные стратегии ядовитых змей рода Vipera на ранних стадиях онтогенеза, когда гранулоцитарная составляющая крови, реализующая сильные врожденные иммунные ответы, менее активна, определяются, в том числе, и биологической спецификой действия их яда, имеющего более высокую токсичность для основных пищевых объектов у сеголетков по сравнению со взрослыми половозрелыми особями (Атяшева и др., 2016; Горелов, 2018), обеспечивая резистентность и успешное выживание молодых особей в условиях средового стресса.
作者简介
E. Romanova
Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod
编辑信件的主要联系方式.
Email: romanova@ibbm.unn.ru
ORCID iD: 0000-0002-1925-7864
俄罗斯联邦, 23 Gagarin Avenue, Nizhni Novgorod 603022, Russia
E. Solomaykin
Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod
Email: e7v4gen5iy@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-4030-8272
俄罗斯联邦, 23 Gagarin Avenue, Nizhni Novgorod 603022, Russia
A. Bakiev
Institute of Ecology of the Volga River Basin of Russian Academy of Sciences
Email: herpetology@list.ru
ORCID iD: 0000-0002-0338-2740
俄罗斯联邦, 10 Komzina St., Togliatti 445003, Russia
R. Gorelov
Institute of Ecology of the Volga River Basin of Russian Academy of Sciences
Email: gorelov.roman@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0207-2951
俄罗斯联邦, 10 Komzina St., Togliatti 445003, Russia
参考
- Ananjeva N. B., Orlov N.L. Resources of venomous snakes of fauna of Russia In: Fundamental Grounds of Biological Resources Management. Moscow, KMK Scietific Press Ltd, 2005, pp. 147–157 (in Russian).
- Atyasheva T. N., Malenyov A. L., Gorelov R. A., Klenina A. A., Bakiev A. G. Age differences in the properties of vipers’ snake venom of the Volga River Basin. Vestnik of Saint Petersburg University, Ser. 3. Biology, 2016, iss. 3, pp. 15–19 (in Russian).
- Brodsky A. K., Safronova D. V. The global ecological crisis: View through the prism of biodiversity. Biosfera, 2017, vol. 9, no.1, pp. 48 – 70 (in Russian).
- Vorobieva A. S. Comparative characteristics of the peripheral blood of snakes of the Volga basin. Actual Problems of Herpetology and Toxinology, 2007, iss. 10, pp. 25–30 (in Russian).
- Ganshchuk S. V., Vorobyova A. C., Chazova T. V. Characteristics of peripheral blood in Vipera berus and V. renardi. The Problems of Herpetology: Proceedings of the 3th Meeting of the Nikolsky Herpetological Society. Saint Petersburg, Zoological Institute of RAS Publ., 2008, pp. 101–104 (in Russian).
- Gelashvili D. B., Krylov V. N., Romanova E. B. Zootoxinology: Bioecological and Biomedical Aspects: Manual. Nizhni Novgorod, Nizhni Novgorod State University Press, 2015. 770 p. (in Russian).
- Gorelov R. A. Venom Release and Toxicity of the Venom of Vipers in the Volga Basin. Thesis Diss. Cand. Sci. (Biol.). Togliatti, 2018. 21 p. (in Russian).
- Pavlov A. V. Ecological and Morphological Characteristics of the Common Viper (Vipera berus L.) Depending on Natural and Artificial Environmental Conditions. Diss. Cand. Sci. (Biol.). Kazan, 1998. 174 р. (in Russian).
- Pavlov A. V. Key moments of reptile hematology: Features of the assessment of the leukocyte part of blood. Proceedings. Volga Region. Natural Sciences, 2019, no. 1 (25), pp. 138–152 (in Russian). https://doi.org/10.21685/2307-9150-2019-1-14
- Rebrova O. Y. Statisticheskii analiz meditsinskikh dannykh. Primenenie paketa prikladnykh programm STATISTICA [Statistical Analysis of Medical Data. Application of STATISTICA]. Moscow, MediaSphera Publ., 2006. 305 p. (in Russian).
- Romanova E. B., Solomaykin E. I., Bakiyev A. G., Gorelov R. A. Comparative data on the leukocytic blood formula of Vipera berus and Vipera renardi. Current Studies in Herpetology, 2017, vol. 17, iss. 1–2, pp. 51–55 (in Russian). https://doi.org/10.18500/1814-6090-2017-17-1-2-51-55
- Romanova E. B., Solomajkin E. I., Bakiev A. G., Malenev A. L., Gorelov R. A. Parameters of leukocyte blood system vipers Vipera berus berus, V. berus nikolskii and V. renardi bashkirovi in serpentaria. Izvestia of Samara Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, 2018, vol. 20, no. 2, pp. 61–66 (in Russian).
- Khairutdinov I. Z., Sokolina F. M. Kharakteristika krovi reptilii i ee sviaz' s usloviiami sredy obitaniia [Reptile Blood Characteristics and their Connection with Environmental Conditions]. Kazan, Kazan State University Publ., 2010. 44 p. (in Russian).
- Halafian A. A. STATISTIKA 6. Statisticheskii analiz dannykh [STATISTICA 6. Statistical Data Analysis]. Moscow, Binom-Press Ltd, 2007. 512 p. (in Russian).
- Arican H., Cicek K. Morphology of peripheral blood cells from various species of Turkish herpetofauna. Acta Herpetologica, 2010, vol. 5, no. 2, pp. 179–198. https://doi.org/10.13128/Acta_Herpetol-8526
- Davis A. K., Maney D. L., Maerz J. C. The use of leukocyte profiles to measure stress in vertebrates: A review for ecologists. Functional Ecology, 2008, vol. 22, pp. 760–772.
- Campbell T. W. Clinical pathology of reptiles. In: Reptile Medicine and Surgery. 2nd ed. St. Louis (MO), Saunders Publishing, 2006, pp. 453–470.
补充文件
