Оценка уровня экспрессии miR-338-3p в диагностике аутоиммунной пузырчатки

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Аутоиммунная пузырчатка ― группа потенциально смертельных хронических дерматозов, при которых возникают пузыри на коже и слизистых оболочках в результате фиксации аутоантител класса IgG на десмосомах в эпидермисе, акантолиза кератиноцитов. В настоящее время ведётся поиск методов контроля активности и терапии заболевания с помощью различных биомаркеров. Одним из таких направлений стало изучение экспрессии микроРНК, в частности miR-338-3p, поскольку изменение её экспрессии может быть пусковым фактором в дисбалансе Th1/Th2 клеток и, следовательно, играть роль в патогенезе заболевания.

Цель исследования ― разработать технологию оценки уровня экспрессии miR-338-3p в мононуклеарных клетках периферической крови и оценить диагностическую ценность экспрессии miR-338-3p при аутоиммунной пузырчатке.

Материалы и методы. Экспериментальное проспективное сравнительное исследование проводилось в период с февраля 2023 по февраль 2024 года. В исследование включены 10 пациентов с аутоиммунной пузырчаткой в активной стадии заболевания (5 мужчин, 50%; 5 женщин, 50%; средний возраст 46±10,7 года), 3 пациента в стадии ремиссии (2 женщины, 66,7%; 1 мужчина, 33,3%; средний возраст 57±8 лет) и 9 участников группы контроля (8 женщин, 88,9%; 1 мужчина, 11,1%; средний возраст 36±16,8 года). Изучение экспрессии miRNA-338-3p проводили с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, кДНК получали на основе технологии StemLoop. Оценка уровня экспрессии miRNA-338-3p основывалась на её сравнении с экспрессией малой ядерной РНК U6.

Результаты. Средний уровень экспрессии miR-338-3p у пациентов в активной стадии заболевания составил 8,64 (SD±5,72), в ремиссии ― 3,38 (SD±1,44), в группе контроля ― 1,48 (SD±1,12). Выявлено статистически значимое повышение уровня экспрессии miR-338-3p у пациентов в активной стадии заболевания по сравнению с группой контроля (p=0,002). Установлена статистически значимая связь между уровнем экспрессии miR-338-3p и величиной значения индекса площади поражения при пузырчатке PDAI (p <0,001).

Заключение. По результатам проведённого исследования можно сделать вывод о значимости микроРНК при аутоиммунной пузырчатке, а экспрессия miR-338-3p, в частности, может служить ключевым элементом в патогенезе данного заболевания. Более детальное изучение микроРНК и анализ вариабельности экспрессии в зависимости от клинических данных может стать основой для создания новых диагностических методов, а также оценки степени тяжести, что позволит применять более точные и менее инвазивные методы диагностики, а также контролировать и прогнозировать течение заболевания.

Об авторах

Наталия Павловна Теплюк

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)

Email: teplyukn@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5800-4800
SPIN-код: 8013-3256

доктор медицинских наук, профессор

Россия, 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Дарья Витальевна Мак

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)

Автор, ответственный за переписку.
Email: dariamak25@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-7020-0572
SPIN-код: 8204-4555
Россия, 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Юлия Владимировна Колесова

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)

Email: kolesovamsmu@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-3617-2555
SPIN-код: 1441-8730
Россия, 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Анфиса Александровна Лепехова

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)

Email: anfisa.lepehova@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-4365-3090
SPIN-код: 3261-3520

кандидат медицинских наук, доцент

Россия, 119991, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2

Татьяна Александровна Федотчева

Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова

Email: tfedotcheva@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4998-9991
SPIN-код: 1261-5650

доктор медицинских наук, профессор

Россия, Москва

Дарья Николаевна Ульченко

Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова

Email: motci@list.ru
ORCID iD: 0009-0008-1894-5746
SPIN-код: 9735-2364
Россия, Москва

Список литературы

  1. Олисова О.Ю., Теплюк Н.П. Иллюстрированное руководство по дерматологии для подготовки врачей к аккредитации. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2023. 376 с.
  2. Махнева В.М., Теплюк Н.П., Белецкая Л.В. Аутоиммунная пузырчатка: от истоков развития до наших дней. Москва: Изд. Решения, 2016. 308 с.
  3. Joly P., Litrowski N. Pemphigus group (vulgaris, vegetans, foliaceus, herpetiformis, brasiliensis) // Clin Dermatol. 2011. Vol. 29, N 4. Р. 432–436. doi: 10.1016/j.clindermatol.2011.01.013
  4. Amagai M., Tanikawa A., Shimizu T., et al.; Committee for Guidelines for the Management of Pemphigus Disease. Japanese guidelines for the management of pemphigus // J Dermatol. 2014. Vol. 41, N 6. Р. 471–486. doi: 10.1111/1346-8138.12486
  5. Kridin K. Pemphigus group: Overview, epidemiology, mortality, and comorbidities // Immunol Res. 2018. Vol. 66, N 2. Р. 255–270. EDN: MOQLDI doi: 10.1007/s12026-018-8986-7
  6. Shamim T., Varghese V.I., Shameena P.M., Sudha S. Pemphigus vulgaris in oral cavity: Clinical analysis of 71 cases // Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2008. Vol. 13, N 10. Р. E622–E626.
  7. Pollmann R., Schmidt T., Eming R., Hertl M. Pemphigus: A comprehensive review on pathogenesis, clinical presentation and novel therapeutic approaches // Clin Rev Allergy Immunol. 2018. Vol. 54, N 1. Р. 1–25. EDN: YEXVDV doi: 10.1007/s12016-017-8662-z
  8. Gonçalves G.A., Brito M.M., Salathiel A.M., et al. Incidence of pemphigus vulgaris exceeds that of pemphigus foliaceus in a region where pemphigus foliaceus is endemic: Analysis of a 21-year historical series // An Bras Dermatol. 2011. Vol. 86, N 6. Р. 1109–1112. doi: 10.1590/s0365-05962011000600007
  9. Harel-Raviv M., Srolovitz H., Gornitsky M. Pemphigus vulgaris: The potential for error. A case report // Spec Care Dentist. 1995. Vol. 15, N 2. Р. 61–64. doi: 10.1111/j.1754-4505.1995.tb00478.x 20
  10. Morishima-Koyano M., Nobeyama Y., Fukasawa-Momose M., et al. Case of pemphigus foliaceus misdiagnosed as a single condition of erythrodermic psoriasis and modified by brodalumab // J Dermatol. 2020. Vol. 47, N 5. Р. e201–e202. doi: 10.1111/1346-8138.15295
  11. Daltaban Ö., Özçentik A., Karakaş A., et al. Clinical presentation and diagnostic delay in pemphigus vulgaris: A prospective study from Turkey // J Oral Pathol Med. 2020. Vol. 49, N 7. Р. 681–686. doi: 10.1111/jop.13052
  12. Хамаганова И.В., Маляренко Е.Н., Денисова Е.В., и др. Ошибка в диагностике вульгарной пузырчатки: клинический случай // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2017. Т. 20, № 1. С. 30–33. EDN: YGTAJL doi: 10.18821/1560-9588-2017-20-1-30-33
  13. Петрова С.Ю., Бержец В.М., Радикова О.В. Трудности дифференциальной диагностики пузырных дерматозов. Эритематозная пузырчатка: случай из клинической практики // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2017. № 4. С. 31–36. EDN: YWEQBI doi: 10.14427/jipai.2017.4.31
  14. Petruzzi M., Vella F., Squicciarini N., et al. Diagnostic delay in autoimmune oral diseases // Oral Dis. 2023. Vol. 29, N 7. Р. 2614–2623. EDN: ZIUCAV doi: 10.1111/odi.14480
  15. Теплюк Н.П., Колесова Ю.В., Мак Д.В., и др. Аутоиммунная пузырчатка: новые подходы к диагностике и оценке тяжести заболевания // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2023. Т. 26, № 5. С. 515–526. EDN: MSAHYT doi: 10.17816/dv492306
  16. Saha M., Bhogal B., Black M.M., et al. Prognostic factors in pemphigus vulgaris and pemphigus foliaceus // Br J Dermatol. 2014. Vol. 170, N 1. Р. 116–122. doi: 10.1111/bjd.12630
  17. Delavarian Z., Layegh P., Pakfetrat A., et al. Evaluation of desmoglein 1 and 3 autoantibodies in pemphigus vulgaris: Correlation with disease severity // J Clin Exp Dentistry. 2020. Vol. 12, N 5. Р. e440–e445. doi: 10.4317/jced.56289
  18. Russo I., De Siena F.P., Saponeri A., Alaibac M. Evaluation of anti-desmoglein-1 and anti-desmoglein-3 autoantibody titers in pemphigus patients at the time of the initial diagnosis and after clinical remission // Medicine. 2017. Vol. 96, N 46. Р. e8801. doi: 10.1097/MD.0000000000008801
  19. Condrat C.E., Thompson D.C., Barbu M.G., et al. MiRNAs as biomarkers in disease: Latest findings regarding their role in diagnosis and prognosis // Cells. 2020. Vol. 9, N 2. Р. 276. EDN: OAGKOW doi: 10.3390/cells9020276
  20. O’Brien J., Hayder H., Zayed Y., Peng C. Overview of microRNA biogenesis, mechanisms of actions, and circulation // Front Endocrinol. 2018. Vol. 9. Р. 402. EDN: HCLKYH doi: 10.3389/fendo.2018.00402
  21. Shu J., Silva B.V., Gao T., et al. Dynamic and modularized microRNA regulation and its implication in human cancers // Sci Rep. 2017. Vol. 7, N 1. Р. 13356. EDN: YKCIGN doi: 10.1038/s41598-017-13470-5
  22. Kozomara A., Griffiths-Jones S. MiRBase: Annotating high confidence microRNAs using deep sequencing data // Nucleic Acids Res. 2014. Vol. 42. Р. D68–73.
  23. Treiber T., Treiber N., Meister G. Regulation of microRNA biogenesis and its crosstalk with other cellular pathways: Nature reviews // Mol Cell Biol. 2019. Vol. 20, N 1. Р. 5–20. doi: 10.1038/s41580-018-0059-1
  24. Long H., Wang X., Chen Y., et al. Dysregulation of microRNAs in autoimmune diseases: Pathogenesis, biomarkers and potential therapeutic targets // Cancer Letters. 2018. Vol. 428. Р. 90–103. EDN: YGWIVF doi: 10.1016/j.canlet.2018.04.016
  25. Dai R., Ahmed S.A. MicroRNA, a new paradigm for understanding immunoregulation, inflammation, and autoimmune diseases. Translational research // J Lab Clin Med. 2011. Vol. 157, N 4. Р. 163–179. doi: 10.1016/j.trsl.2011.01.007
  26. Wang Z., Lu Q., Wang Z. Epigenetic alterations in cellular immunity: New insights into autoimmune diseases // Cell Physiol Biochem. 2017. Vol. 41, N 2. Р. 645–660. EDN: YFIBLS doi: 10.1159/000457944
  27. Weiland M., Gao X.H., Zhou L., Mi Q.S. Small RNAs have a large impact: Circulating microRNAs as biomarkers for human diseases // RNA Biol. 2012. Vol. 9, N 6. Р. 850–859. doi: 10.4161/rna.20378
  28. Valentino A., Leuci S., Galderisi U., et al. Plasma exosomal microRNA profile reveals miRNA 148a-3p downregulation in the mucosal-dominant variant of pemphigus vulgaris // Int J Mol Sci. 2023. Vol. 24, N 14. Р. 11493. EDN: FABUJS doi: 10.3390/ijms241411493
  29. Khabou B., Fakhfakh R., Tahri S., et al. MiRNA implication in the pathogenesis and the outcome of Tunisian endemic pemphigus foliaceus // Exp Dermatol. 2023. Vol. 32, N 7. Р. 1132–1142. doi: 10.1111/exd.14821
  30. He W., Xing Y., Li C., et al. Identification of six microRNAs as potential biomarkers for pemphigus vulgaris: From diagnosis to pathogenesis // Diagnostics (Basel, Switzerland). 2022. Vol. 12, N 12. Р. 3058. EDN: ZZLOOJ doi: 10.3390/diagnostics12123058
  31. Xu M., Liu Q., Li S., et al. Increased expression of miR-338-3p impairs Treg-mediated immunosuppression in pemphigus vulgaris by targeting RUNX1 // Exp Dermatol. 2020. Vol. 29, N 7. Р. 623–629. doi: 10.1111/exd.14111
  32. Lin N., Liu Q., Wang M., et al. Usefulness of miRNA-338-3p in the diagnosis of pemphigus and its correlation with disease severity // Peer J. 2018. Vol. 6. Р. e5388. doi: 10.7717/peerj.5388
  33. Liu Q., Cui F., Wang M., et al. Increased expression of microRNA-338-3p contributes to production of Dsg3 antibody in pemphigus vulgaris patients // Mol Med Rep. 2018. Vol. 18, N 1. Р. 550–556. EDN: VFMILM doi: 10.3892/mmr.2018.8934
  34. Wang M., Liang L., Li L., et al. Increased miR-424-5p expression in peripheral blood mononuclear cells from patients with pemphigus // Mol Med Rep. 2017. Vol. 15, N 6. Р. 3479–3484. doi: 10.3892/mmr.2017.6422
  35. Satyam A., Khandpur S., Sharma V.K., Sharma A. Involvement of T(h)1/T(h)2 cytokines in the pathogenesis of autoimmune skin disease: Pemphigus vulgaris // Immunol Invest. 2009. Vol. 38, N 6. Р. 498–509. doi: 10.1080/08820130902943097
  36. Lee S.H., Hong W.J., Kim S.C. Analysis of serum cytokine profile in pemphigus // Ann Dermatol. 2017. Vol. 29, N 4. Р. 438–445. doi: 10.5021/ad.2017.29.4.438
  37. Rizzo C., Fotino M., Zhang Y., et al. Direct characterization of human T cells in pemphigus vulgaris reveals elevated autoantigen-specific Th2 activity in association with active disease // Clin Experimental Dermatol. 2005. Vol. 30, N 5. Р. 535–540. doi: 10.1111/j.1365-2230.2005.01836.x
  38. Pritchard C.C., Cheng H.H., Tewari M. MicroRNA profiling: Approaches and considerations // Nature Rev Genetics. 2012. Vol. 13, N 5. Р. 358–369. doi: 10.1038/nrg3198
  39. Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) method // Methods. 2001. Vol. 25, N 4. Р. 402–408. doi: 10.1006/meth.2001.1262
  40. Buch A.C., Kuma H., Panicker N., et al. A cross-sectional study of direct immunofluorescence in the diagnosis of immunobullous dermatoses // Indian J Dermatol. 2014. Vol. 59, N 4. Р. 364–368. doi: 10.4103/0019-5154.135488
  41. Belloni-Fortina A., Faggion D., Pigozzi B., et al. Detection of autoantibodies against recombinant desmoglein 1 and 3 molecules in patients with pemphigus vulgaris: Correlation with disease extent at the time of diagnosis and during follow-up // Clin Dev Immunol. 2009. Vol. 2009. Р. 187864. doi: 10.1155/2009/187864
  42. Giurdanella F., Nijenhuis A.M., Diercks G.F., et al. Keratinocyte binding assay identifies anti-desmosomal pemphigus antibodies where other tests are negative// Front Immunol. 2018. Vol. 9. Р. 839. doi: 10.3389/fimmu.2018.00839
  43. Saleh M.A., El-Bahy M.M. Do normal Egyptians possess anti-desmoglein 3 antibodies? // Int J Dermatol. 2015. Vol. 54, N 10. Р. 1145–1149. doi: 10.1111/ijd.12662
  44. Xuan R.R., Yang A., Murrell D.F. New biochip immunofluorescence test for the serological diagnosis of pemphigus vulgaris and foliaceus: A review of the literature// Int J Women’s Dermatol. 2018. Vol. 4, N 2. Р. 102–108. doi: 10.1016/j.ijwd.2017.10.001
  45. Yang A., Xuan R., Melbourne W., et al. Validation of the BIOCHIP test for the diagnosis of bullous pemphigoid, pemphigus vulgaris and pemphigus foliaceus // J Eur Acad Dermatol Venereol. 2020. Vol. 34, N 1. Р. 153–160. doi: 10.1111/jdv.15770
  46. Sanz-Rubio D., Martin-Burriel I., Gil A., et al. Stability of circulating exosomal miRNAs in healthy subjects // Sci Rep. 2018. Vol. 8, N 1. Р. 10306. EDN: VHZDCQ doi: 10.1038/s41598-018-28748-5
  47. Matias-Garcia P.R., Wilson R., Mussack V., et al. Impact of long-term storage and freeze-thawing on eight circulating microRNAs in plasma samples // PLoS One. 2020. Vol. 15, N 1. Р. e0227648. doi: 10.1371/journal.pone.0227648
  48. Ward Gahlawat A., Lenhardt J., Witte T., et al. Evaluation of storage tubes for combined analysis of circulating nucleic acids in liquid biopsies // Int J Mol Sci. 2019. Vol. 20, N 3. Р. 704. doi: 10.3390/ijms20030704
  49. Papara C., Zillikens D., Sadik C.D., Baican A. MicroRNAs in pemphigus and pemphigoid diseases // Autoimmunity Rev. 2021. Vol. 20, N 7. Р. 102852. EDN: BWVCMC doi: 10.1016/j.autrev.2021.102852
  50. Ramani P., Ravikumar R., Pandiar D., et al. Apoptolysis: A less understood concept in the pathogenesis of pemphigus vulgaris // Apoptosis. 2022. Vol. 27, N 5-6. Р. 322–328. EDN: FRNMYI doi: 10.1007/s10495-022-01726-z
  51. Lee A.Y., Kim T., Kim J.H. Understanding CD4+ T cells in autoimmune bullous diseases // Front Immunol. 2023. Vol. 14. Р. 1161927. EDN: XEJLJM doi: 10.3389/fimmu.2023.1161927
  52. Araghi F., Dadkhahfar S., Robati R.M., et al. The emerging role of T cells in pemphigus vulgaris: A systematic review // Clin Exp Med. 2023. Vol. 23, N 4. Р. 1045–1054. EDN: AXVIWX doi: 10.1007/s10238-022-00855-8
  53. Rodriguez M.S., Egaña I., Lopitz-Otsoa F., et al. The RING ubiquitin E3 RNF114 interacts with A20 and modulates NF-κB activity and T-cell activation // Cell Death Dis. 2014. Vol. 5, N 8. Р. e1399. doi: 10.1038/cddis.2014.366
  54. Yang P., Lu Y., Li M., et al. Identification of RNF114 as a novel positive regulatory protein for T cell activation // Immunobiol. 2014. Vol. 219, N 6. Р. 432–439. EDN: SQZAYB doi: 10.1016/j.imbio.2014.02.002

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Средний уровень экспрессии miR-338-3p. Группы: 1 ― пациенты в активной стадии заболевания; 2 ― пациенты в стойкой ремиссии; 3 ― контроль (группа условно здоровых добровольцев).

Скачать (242KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Связь между уровнем экспрессии miR-338-3p и величиной индекса PDAI.

Скачать (282KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2024


 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».