Изучение экспрессии гена IL-1β под действием комплексов миРНК, обладающих противогриппозным действием

Грипп является одной из наиболее актуальных проблем мирового здравоохранения на сегодняшний день. Вирус гриппа обладает иммуносупрессивными свойствами, что способно приводить к развитию вторичных иммунодефицитов, препятствуя функционированию механизмов активации системы интерферонов, приводя к нарушению образования провоспалительных цитокинов. Наиболее важным участником формирования противовирусного иммунитета является IL-1β. Данный цитокин играет важную роль в повышении экспрессии генов MCP-1 и MCP-3 и созревании макрофагов и дендритных клеток. Индукция выработки IL-1β происходит в результате взаимодействия лиганда с Toll-подобными рецепторами. В настоящее время существует большое количество препаратов, направленных на профилактику и терапию гриппозной инфекции, однако их применение в ряде случаев является затруднительным ввиду высокой мутационной изменчивости вируса гриппа, что делает его устойчивым к данным препаратам. Следовательно, особо важным является вопрос разработки и создания эффективных методов борьбы с подобными инфекциями. Перспективным методом терапии и профилактики вирусных респираторных инфекций может являться процесс РНК-интерференции. РНК-интерференция – процесс деградации чужеродной мРНК посредством молекул малых интерферирующих РНК (миРНК). Целью настоящего исследования является оценка экспрессии гена IL- 1β при трансфекции комплексов миРНК, направленных к клеточным генам FLT4, Nup98, Nup205. Оценка изменения вирусной репродукции проводилась с помощью титрования по ЦПЭ вируссодержащей жидкости. Уровень экспрессии гена IL-1β определялся с помощью ОТ-ПЦР-РВ. По результатам оценки изменения вирусной репродукции получено, что использование всех комплексов миРНК, направленных к клеточным генам, приводит к достоверному снижению вирусной репродукции на первые сутки после заражения. Применение комплексов Nup205 + FLT4 и FLT4 + Nup205 + Nup98 приводило к снижению вирусной репродукции также и на вторые сутки (р < 0,05) соответственно, по сравнению с неспецифическим и вирусным контролями. При анализе экспрессионного профиля гена IL-1β наблюдался рост его экспрессии на 1-е сутки для всех комплексов миРНК и на 2-е и 3-и сутки для комплексов Nup98 + FLT4 и Nup205 + Nup98. В ходе исследования было установлено, что подавление активности клеточных генов FLT4, Nup98 и Nup205, необходимых для вирусной репродукции, приводило к достоверному снижению вирусной активности и росту экспрессии IL-1β.