Purification method optimization of recombinant basic fibroblast growth factor rhfgf-2 expressed in methylotrophic yeast Pichia pastoris

Capa

Citar

Texto integral

Acesso aberto Acesso aberto
Acesso é fechado Acesso está concedido
Acesso é fechado Somente assinantes

Resumo

Basic human fibroblast growth factor FGF-2 plays a major role in wound healing. Thus, its regenerative potential attracts both researchers and commercial drug manufacturers, including cell therapy developers. This research aims to optimize purification method to obtain high purity rhFGF-2 expressed in methylotrophic yeast Pichia pastoris. Suggested method allows purification of rhFGF-2 with purity of >98% as determined by SDS-PAGE. The effective proliferative dose of rhFGF-2 determined by WST-1 proliferative assay on 3T3 mouse fibroblast cell culture is 5.73 ± 2.16 ng/ml. The presented optimized technique may be attractive for the development of an industrial technology for rhFGF-2 production.

Sobre autores

A. Misterova

Vyatka State University

Email: usr21438@vyatsu.ru
Kirov, 610000 Russia

A. Gerasimov

Vyatka State University

Autor responsável pela correspondência
Email: usr21438@vyatsu.ru
Kirov, 610000 Russia

Bibliografia

  1. Zhang D., Mai Q., Li T., Huang J., Ding C., Jia M. et al. // Stem Cell Res. Ther. 2016. V. 7. № 1. https://doi.org/10.1186/s13287-016-0347-7
  2. Estapé D., Heuvel J.V.D., Rinas U. // Biochem. J. 1998. V. 335. № 2. P. 343–349.
  3. Chen R., John J., Lavrentieva A., Müller S., Tomala M., Zhao Y. et al. // Engineering in Life Sciences. 2012. V. 12. № 1. P. 29 –38.
  4. Mu X., Kong N., Chen W., Zhang T., Shen M., Yan W. // Protein Expr. Purif.. 2008. V. 59. № 2. P. 282–288.
  5. Sauer D.G., Mosor M., Frank A.C., Weiß F., Christler A., Walch N. et al. // Protein Expr. Purif.. 2019. V. 153. P. 70–82.
  6. Патент РФ . 2023. № 2804544.
  7. Garcia-Ortega X., Adelantado N., Ferrer P., Montesinos J.L., Valero F. // Process Biochemistry. 2016. V. 51. № 6. P. 681–691.
  8. Sauer D.G., Mosor M., Jungbauer A., Dürauer A. // Sep . Purif. Technol. 2021. V. 254. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2020.117564
  9. Мистерова А.-А.В., Чичерин В.А., Герасимов А.С. // Прикл. биохимия и микробиология. 2023. T. 59. № 4. C. 383–391.
  10. Bolten S.N., Knoll A.S., Li Z., Gellermann P., Pepelanova I., Rinas U. et al. // Journal of Chromatography A. 2020. V. 1626. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2020.461367
  11. Abdelhakim M., Lin X., Ogawa R. // Dermatol. Ther . (Heidelb.). 2020. V. 10. № 4. P. 569– 587.
  12. Kanemaru S. // Operative Techniques in Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 2021. V. 32. № 2. P. 111–115.
  13. Nagayasu-Tanaka T., Anzai J., Takedachi M., Kitamura M., Harada T., Murakami S. // Regenerative Therapy. 2023. V. 23. P. 84–93.
  14. Fu X. Regenerative Medicine in China. / Ed. Fu X. Singapore: Springer Singapore, 2021. 485 p.
  15. Zheng K., Feng G., Zhang J., Xing J., Huang D., Lian M. et al. // Int. J. Neurosci. 2021. V. 131. № 7. P. 625–633.
  16. Moghtader F., Tabata Y., Karaöz E. // Gels. 2024. V. 10 . № 8. https://doi.org/10.3390/gels10080493
  17. Chen B., He J., Yang H., Zhang Q., Zhang L., Zhang X. et al. // Sci Rep. 2015. V. 5. № 1. https:// doi.org/10.1038/srep09017
  18. Kona S., Dong J.F., Liu Y., Tan J., Nguyen K.T. // Int. J. Pharm. 2012. V. 423. № 2. P. 516 –524.
  19. Auletta J.J., Zale E.A., Welter J.F., Solchaga L.A. // Stem Cells International. 2011. V . 3. https :// doi . org /10.4061/2011/235176

Arquivos suplementares

Arquivos suplementares
Ação
1. JATS XML
Baixar

Declaração de direitos autorais © Russian Academy of Sciences, 2025

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».