Разработка УФ-спектрофотометрического метода количественного определения метаболита клопидогрела, пригодного для химико-токсикологического анализа

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Введение. В России более 50% всех заболеваний и 20% всех случаев инвалидности приходится на долю ишемической болезни сердца и инсульта. Согласно рекомендациям Российского кардиологического общества и Европейского общества кардиологов, в стандарты лечения больных COVID-19 входит антитромбоцитарная терапия клопидогрелом. Клопидогрел является пролекарством, при помощи эстераз происходит гидролиз с образованием основного (неактивного) циркулирующего метаболита - производной карбоновой кислоты, который составляет 85% всех метаболитов данного препарата. По информации, приведенной в научной литературе за последние 10 лет, клопидогрел представляет интерес с точки зрения химико-токсикологических исследований, поскольку данный лекарственный препарат очень часто становится «препаратом выбора» в целях суицида. Цель исследования: разработка и валидация методики количественного определения основного метаболита клопидогрела - клопидогрел карбоновой кислоты с помощью доступного и широко внедренного в практику химико-токсикологического анализа метода УФ-спектрофотометрии. Материал и методы. Объекты исследования - клопидогрел карбоновая кислота (CLA) субстанция-порошок. Светопоглощение растворов в УФ-спектре измеряли на спектрофотометре СФ-46 (АО «ЛОМО», Россия), спектральный диапазон измерений - от 200 до 350 нм. Использовали стандартный раствор клопидогрел карбоновой кислоты в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты (100 мкг/мл). Результаты. Для количественного определения основного метаболита клопидогрела (клопидогрел карбоновой кислоты) оптимальная длина волны составляет 278 нм. Калибровочный график для УФ-спектрофотометрического метода описывался уравнением: А=0,004128С - 0,008667. Линейность наблюдали в пределах концентраций клопидогрел карбоновой кислоты 20,0-200 мкг/мл; LOD и LOQ в пробе составили соответственно 1,655 и 5,015 мкг. Заключение. Разработанная методика количественного определения основного метаболита клопидогрела - клопидогрел карбоновой кислоты с использованием УФ-спектрофотометрического метода удовлетворяют требованиям к методам, рекомендованным для использования в судебной токсикологии, что подтверждено валидационными характеристиками.

Об авторах

Людмила Сергеевна Аносова

Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького

Автор, ответственный за переписку.
Email: apteka-nanya@yandex.ru
ассистент кафедры фармацевтической и медицинской химии ДНР, 283003, Донецк

Ирина Петровна Ремезова

Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России

Email: i.p.remezova@pmedpharm.ru
профессор кафедры токсикологической и аналитической химии, доктор фармацевтических наук Россия, г. Пятигорск

Алексей Михайлович Агафонов

Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького

Email: chuh2008@yandex.ru
ассистент кафедры фармацевтической и медицинской химии ДНР, 283003, Донецк

Список литературы

  1. Nijenh V.J. uis et al. Anticoagulation with or without Clopidogrel after Transcatheter Aortic-Valve Implantation. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (18): 1696707. doi: 10.1056/NEJMoa1915152
  2. Zurowska-Wolak M., Owsiak M., Bartus S., Mikos M. The influence of pre-hospital medication administration in ST-elevation myocardial infarction patients on left ventricular ejection fraction and intrahospital death. Postepy Kardiol Interwencyjnej. 2021; 17 (1): 39-45. doi: 10.5114/aic.2021.104766
  3. Pena A., Collet J.P., Hulot J.S. et al. Can we override clopidogrel resistance. Circulation. 2009; 119 (21): 2854-7.
  4. Голухова Е.З., Григорян М.В., Рябинина М.Н. Современные аспекты фармакогенетики клопидогрела и его клиническое значение. Креативная кардиология. 2014; 3: 39-52.
  5. Редькіна Є.А., Ткаченко Н.О., Гладишев В. В. Маркетингові дослідження українського ринку антиагрегантів. Фармацевтичний журнал. 2016; 3-4: 12-5.
  6. Аносова Л.С. Распределение клопидогрела в органах отравленных животных. Фармация. 2021; 70 (6): 31-6. doi: 10.29296/25419218-2021-06-06
  7. Державна Фармакопея України. Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». Доповнення 2. Харків: РІРЕГ, 2008; 608.
  8. Kocabay G., Okçular I., Akkaya V., Güler K. Suicide attempt with clopidogrel. Hum. Exp. Toxicol. 2006; 25 (12): 731-4.
  9. Borderias C.L., Garrapiz L.J., Caballero G. Pulmonary haemorrhage and haemothorax after massive ingestion of clopidogrel as a suicide attempt. Arch. Bronconeumol. 2009; 45 (11): 570-1. DOI: 10.1016/j. arbres.2009.06.009.
  10. Al Asmar R., Zeid F. Acute Hemothorax Causing Hemorrhagic Shock Following Small-bore Thoracocentesis in a Patient on Clopidogrel: A Case Report and Literature Review. Cureus. 2020; 12 (3): e7431. doi: 10.7759/cureus.7431.
  11. Attimarad M. Simultaneous Determination of Ofloxacin and Flavoxate Hydrochloride by Absorption Ratio and Second Derivative UV Spectrophotometry. J. Basic Clin. Pharm. 2010; 2 (1): 53-61.
  12. Stolarczyk M., Apola А., Maslanka А. et al. Spectrophotometric method for simultaneous determination of valsartan and substances from the group of statins in binary mixtures. Acta Pharm. 2017; 67 (4): 463-78. doi: 10.1515/acph-2017-0031
  13. Stolarczyk M., Maslanka А., Apola А. et al. Derivative spectrophotometric method for simultaneous determination of zofenopril and fluvastatin in mixtures and pharmaceutical dosageforms. Spectrochim. Acta A Mol. Biomol. Spectrosc. 2015; 148: 66-71. doi: 10.1016/j.saa.2015.03.100
  14. Parojcic J., Karljikovic-Rajic K., Duric Z. et al. Development of the second-order derivative UV spectrophotometric method for direct determination of paracetamol in urine intended for biopharmaceutical characterisation of drug products. Biopharm. Drug Dispos. 2003; 24 (7): 309-14. doi: 10.1002/bdd.367.
  15. Duran Meras I., Espinosa Mansilla A., Salinas Lopez F., Rodriguez Gomez M.Comparison of UV derivative-spectrophotometry and partial least-squares (PLS-1) calibration for determination of methotrexate and leucovorin in biological fluids. Anal. and Bioanal. Chem. 2002; 373 (4-5): 251-8. doi: 10.1007/s00216-002-1348-1.
  16. Вергейчик Т.Х., Линникова В.А., Гуськова Г.Б. Химико-токсикологический анализ биологических объектов на метопролол и кветиапин. Изв. Самарского науч. центра Рос. академии наук. 2012; 14 (5 (3)): 700-3.
  17. Tolba M.M., Salim M.M. Derivative Quotient Spectrophotometry and an Eco-Friendly Micellar Chromatographic Approach with Time-Programmed UV-Detection for the Separation of Two Fluoroquinolones and Phenazopyridine. J. Chromatogr. Sci. 2016; 54 (5): 776-89. doi: 10.1093/chromsci/bmw010.
  18. Барам Г.И., Рейхарт Д.В., Гольдберг Е.Д. Новые возможности высокоэффективной жидкостной хроматографии в фармакопейном анализе. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003; 135 (1): 75-9.
  19. Бондар В.С., Аносова Л.С. Високоефективна рідинна хроматографія в аналізі клопідогрелю. Фармацевт. часоп. 2012; 4 (24): 73-8.
  20. Pawaskar P.S. et al. Development of Reverse Phase Liquid Chromatographic Method for Determination of (+)-(S)-(o-Chlorophenyl)-6,7- Dihydrothieno [3,2-c] pyridine-5(4H)-acetic acid,Hydrochloride and Methyl (+/-) - (o- Chloro phenyl)- 4,5-Dihydrothieno[2,3-c] pyridine-6(7H)-acetate, Hydrochloride from Clopidogrel Besylate.Int. J. Pharm. Res. Sch. 2013; 2 (1): 16-23.
  21. Pawaskar P. et al. Development of Normal Phase Liquid Chromatographic Method for determination of Methyl (-) - (R) - (o- chlo-rophenyl) -6, 7- dihyrothieno [3, 2-C] pyridine -5(4H) acetate, hydrogen sulphate from ClopidogrelBesylate.Int. J. Pharm Sci. 2013; 5 (1): 1971-6.
  22. Аносова Л.С. Химико-токсикологическое исследование клопидогрела. COLLECTIVE MONOGRAPH «The modern stage of the development of medical education in Ukraine and EU countries». Medical University of Lublin. Poland. 2021; 1-25. doi: 10.30525/978-9934-26-090-2-1
  23. Бондар В.С., Аносова Л.С., Шовкова З.В. Ідентифікація клопідогрелю та його метаболіту за допомогою методу тонкошарової хроматографії. Укр. мед. альм. 2013; 16 (1): 50-2.
  24. Бондар В.С., Аносова Л.С. Екстракцмно-фотометричне визначення клотдогрелю. Укр. мед. альм. 2012; 15 (5) (додаток): 43-4.
  25. Бондарь В.С., Аносова Л.С., Шовковая З.В. Изолирование клопидогрела и его метаболита из биоматериала. Фармация Казахстана. 2013; 7: 34-7.
  26. Бондарь В.С., Аносова Л.С., Шовковая З.В. Изолирование клопидогрела и его метаболита из биологических жидкостей. Фармация Казахстана. 2013; 9: 59-60.
  27. SOFT/AAFS Forensic Laboratory Guidelines. 2006; 24. [Электронный ресурс]. Available at: http://www.soft-tox.org/files/ Guidelines_2006_Final.pdf. (дата обращения 12.06.2022).

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Продукт гидролиза, основной неактивный метаболит клопидогрела – клопидогрел карбоновая кислота

Скачать (18KB)
Метаданные
3. Рис. 2. УФ-спектр клопидогрел карбоновой кислоты в 0,1 М растворе хлороводородной кислоты (концентрация 100 мкг/мл; l=10 мм)

Скачать (81KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Градуировочный график для УФ-спектрофотометрического определения клопидогрел карбоновой кислоты (λ=278 нм; l=10 мм)

Скачать (46KB)
Метаданные

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».