Новые рекомбинантные антигены T. pallidum Tp0453 и Tp0319 в диагностике сифилиса

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

С использованием методов генной инженерии разработана технология получения рекомбинантного варианта нового целевого белка T. pallidum Tp0319 для серологической диагностики сифилиса. В результате проведенных работ получен гомогенный (по данным денатурирующего электрофореза в полиакриламидном геле) рекомбинантный вариант белка T. pallidum Tp0319. Молекулярная масса рекомбинантного белка T. pallidum Tp0319, определенная по электрофоретической подвижности, составила около 37 кД, что хорошо согласуется с молекулярной массой фрагмента белка Tp0319 без сигнального пептида, рассчитанной по аминокислотной последовательности (37,3 кД). В соответствии с разработанной технологией были получены очищенные рекомбинантные белки T. pallidum Tp0319 и Tp0453. Эти белки были использованы в качестве антигенов в составе твердофазного иммуносорбента для выявления специфических IgG к исследуемому белку в сыворотке крови больных с разными формами приобретенного сифилиса. Применение полученного рекомбинантного белка позволило выявить антитела к T. pallidum в сыворотке крови больных сифилисом (первичным, вторичным, скрытым ранним и поздним). При исследовании образцов сыворотки крови, полученных от здоровых доноров, антитела не обнаруживались. Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о возможности использования полученного рекомбинантного белка Тр0319 в качестве дополнительного антигена при диагностике сифилиса. Включение нового антигена в состав иммуносорбента тест-систем для диагностики сифилиса (в формате иммуноферментного анализа, иммуноблотинга или иммуночипа) расширяет возможности серологической диагностики данного заболевания за счет увеличения спектра определяемых антител к T. pallidum.

Об авторах

А. В. Рунина

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: runina@cnikvi.ru
Россия

Р. Ф. Хайруллин

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

К. В. Рог

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

В. И. Семина

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

С. В. Ротанов

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Список литературы

  1. Chi B., Chauhan S., Kuramitsu H.; Development of a System for Expressing Heterologous Genes in the Oral Spirochete Treponema denticola and Its Use in Expression of the Treponema pallidum flaA Gene. Inf immun 1999; 67 (7): 3653-3656.
  2. Cameron C.E., Kuroiwa J.M., Yamada M., Francescutti T., Chi B., Kuramitsu H.K. Heterologous expression of the Treponema pallidum lamininbinding adhesin Tp0751 in the culturable spirochete Treponema phagedenis. J bacteriol 2008; 190 (7): 2565-2571. Литература
  3. Khairullin R.F., Rotanov S.V., Frigo N.V., Belousova A.V. Bioinformatic analysis of T. pallidum specific antigens Vestn Dermatol Venerol 2012; 5: 56-64.
  4. Cox D.L., Luthra A., Dunham-Ems S., Desrosiers D.C., Salazar J.C., Caimano M.J., Radolf J.D. Surface immunolabeling and consensus computational framework to identify candidate rare outer membrane proteins of Treponema pallidum. Inf immun 2010; 78 (12): 5178-5194.
  5. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. nature 1970; 227 (5259): 680-685.
  6. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical biochemistry 1976; 72 (1): 248-254.
  7. Khairullin R.F., Runina A.V., Rog K.V., Frigo N.V., Rotanov S.V. Production and evaluation of the clinical efficacy of the recombinant T. pallidum antigen Tp0453 for syphilis diagnosis. Vestn Dermatol Venerol 2013; 6: 73-79.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Рунина А.В., Хайруллин Р.Ф., Рог К.В., Семина В.И., Ротанов С.В., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».