Исследование влияния препарата лошадиного коллагена I типа на процесс коллагенеза в экспериментальной модели с помощью измерения экспрессии генов и гистологической оценки тканей

Цель исследования: изучить влияние препарата лошадиного коллагена I типа на процесс коллагенеза на мышиной модели с помощью измерения экспрессии генов в коже мыши (гены: COL1, COL3, MMP1, MMP3, ELN, VCAN, IL-6, TNFα, TGFβ) и выполнения гистологического исследования тканей.

Материалы и методы: В исследовании использовали самок мышей линии BALB/C в возрасте 6–8 недель. Животные содержались в стандартных условиях вивария при контролируемой температуре (22±2 °C), влажности (50±10%) и 12/12-часовом световом режиме с доступом к воде и корму ad libitum. Экспериментальным животным с помощью триммера на дорсальной поверхности выбривали два участка кожи площадью ~3 см² (день 0). На следующий день (день 1) внутрикожно инъецировали в один участок 100 мкл стерильного физиологического раствора (0,9% NaCl, контроль), а в другой – 100 мкл раствора препарата лошадиного коллагена I типа, разведенного в стерильном физиологическом растворе согласно инструкции производителя. В 1 день эксперимента (спустя 24 часа после первого введения препарата) одно из животных умерщвляли и иссекали участки кожи в зонах инъекций. Экспрессию генов измеряли с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с обратной транскрипцией (RT-rtPCR).

Гистологический анализ проводили на 21-е, 35-е и 53-и сутки.

Результаты: В 1-й день эксперимента (через 24 часа после первой инъекции лошадиного коллагена I типа) в тканях наблюдалось статистически значимое повышение экспрессии генов COL1 и COL3, кодирующих коллаген I и III типов, – основных структурных белков дермы. Это однозначно указывает на запуск синтеза нового коллагена фибробластами. Дополнительно зафиксировано значительное повышение экспрессии TGFβ – одного из ключевых регуляторов фибробластной активности и дифференцировки, который также известен как мощный индуктор коллагенеза. Гистологические данные подтверждают эти молекулярные наблюдения: на 21-е сутки в опытных образцах выявлено более высокое соотношение фибробластов к общему количеству клеток дермы и более плотная организация коллагеновых волокон, чем в контрольной группе. С учетом того, что фибробласты являются главными продуцентами компонентов внеклеточного матрикса, включая коллаген, их высокая плотность в дерме служит косвенным признаком активации синтетической функции кожи под действием препарата.

Также выявлена тенденция к увеличению толщины дермы на 35-е сутки в опытной группе, что может отражать накопление нового матрикса и структурную перестройку ткани. При этом структура коллагеновых волокон на 35-е и 53-и сутки сохраняла компактность и плотность, что указывает на стабилизацию ремоделированного матрикса.