Expression of pyruvate kinase, malate and octopine dehydrogenase genes in the gills of the Mediterranean mussel Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) under conditions of hypoxia and reoxygenation

Мұқаба

Дәйексөз келтіру

Толық мәтін

Аннотация

The effect of hypoxia on the expression level of pyruvate kinase (PKM), octopine dehydrogenase (OcDH) and malate dehydrogenase (MDH) genes in the gill tissue of the Mediterranean mussel Mytilus galloprovincialis (L., 1819) was studied experimentally. The control group of mollusks was kept at 9–10°C and the oxygen level in the water was 8.5 mgO2 l–1. Experimental – at 9–10°C and 2.2 mgO2 l–1. The exposure was 24 and 72 hours. Some of the individuals were subsequently subjected to the reoxygenation procedure. Under conditions of hypoxia, the expression level of OcDH and MDH genes increased by 3 and 2 times, respectively (p < 0.05). At the same time, OcDH expression showed sensitivity to the oxygen content in the medium. Under the conditions of reoxygenation, the process was completely suppressed. The expression of the PKM gene, on the contrary, did not depend on hypoxic effects and remained at the level of control values.

Толық мәтін

Основными причинами образования гипоксических и аноксических зон в шельфовых зонах Мирового океана являются низкая скорость диффузии кислорода и ограничение водообмена (Karstensen et al., 2008; Paulmier, Ruiz-Pino, 2009). Часто это дополняют и процессы эвтрофикации, особенно в местах впадения крупных рек (Rabalais et al., 2014). Ожидается, что в условиях глобального потепления число зон с критически низкой концентрацией кислорода будет только возрастать (Karstensen et al., 2008; Paulmier, Ruiz-Pino, 2009). Это приведет к трансформации, прежде всего, донных сообществ и повысит роль организмов толерантных к условиям гипоксии.

Моллюски считаются одними из наиболее устойчивых организмов к дефициту кислорода. Это качество определяется их способностью переходить к гипометаболическим состояниям (Storey, Storey, 2004) и использовать на этом фоне эффективные анаэробные стратегии, позволяющих поддерживать энергетический статус тканей (St-Pierre et al., 2000; Le Moullac et al., 2007). В условиях острой гипоксии (аноксии) у них отмечается сопряжение реакций гликолиза с процессами белкового обмена. В тканях повышается содержание соединений не свойственных аэробному обмену (аланин, сукцинат) (Buck, 2000), усиливается продукция NH4+ (Chew et al., 2005), растет активность аланин- и аспартатаминотрансфераз (Soldatov et al., 2009).

Ряд авторов отмечают низкую активность лактатдегидрогеназы в тканях моллюсков при внешнем дефиците кислорода (Soldatov et al., 2010). Это допускает образование иных гликолитических метаболитов, например, опинов (Bacchiocchi, Principato, 2000). Семейство опиндегидрогеназ (OpDH) широко представлено среди морских беспозвоночных, в основном представителей типов Mollusca и Annelida (Vázquez-Dorado et al., 2013). Они катализируют восстановительную реакцию конденсации пирувата и аминокислот с образованием опинов (Vázquez-Dorado et al., 2013):

пируват + аминокислоты + + НАДН + Н+ → → опины + Н2О + НАД+.

Среди них выделяется октопиндегидрогеназа (OcDH) (EC 1.5.1.11), проявляющая выраженное сродство к L-аргинину (Vázquez-Dorado et al., 2011). В настоящее время доступны последовательности мРНК и кДНК для данного фермента (Endo et al., 2007). Частично последовательности OcDH представлены в геномных базах для некоторых видов головоногих (Allcock et al., 2007; Strugnell et al., 2008) и двустворчатых моллюсков (Hollenbeck, Johnston, 2018). В ряде работ отмечен рост активности OcDH в тканях моллюсков при гипоксических состояниях (Storey, Dando, 1982). Активность OcDH была идентифицирована и в тканях представителей рода Mytilus (Storey, Dando, 1982), в том числе Mytilus galloprovincialis (Gosling, 1981).

Образование опинов позволяет решить проблему конечных токсических метаболитов (лактат), так как опины не оказывают столь выраженного влияния на величину тканевого рН (Zammit 1978). Об эффективности перестройки терминальных реакций гликолиза в тканях моллюсков в условиях дефицита кислорода можно судить и по уровню экспрессии соответствующих генов.

В настоящей работе, на примере средиземноморской мидии Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819), в условиях эксперимента исследуется влияние острых форм гипоксии на уровень экспрессии генов ряда дегидрогеназ: малат-, октопиндегидрогеназы (MDH, OcDH), а также пируваткиназы (РКМ).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследования выполнены на взрослых особях средиземноморской мидии Mytilus galloprovincialis (L., 1819). Длина раковины – 18.3±0.9 мм. Моллюсков собирали с коллекторных установок в Мартыновой бухте (район Севастополя, Крым) и доставляли в аквариальную в сухих пенопластовых холодильных ящиках в течение 2–3 ч. На протяжении 14 суток их выдерживали в проточной воде для снятия состояния манипуляционного стресса. Кормление осуществлялось смесью микроводорослей по мере выедания.

Контрольная группа мидий содержалась при 9–10°С и уровне кислорода в воде 8.5 мгО2 л–1. Опытная – при 9–10°С и 2.2 мгО2 л–1. Экспозиция – 24 и 72 ч. Фотопериод – 12 ч день : 12 ч ночь. Содержание кислорода в воде понижали путем барботажа газообразным азотом. Контроль за содержанием кислорода в воде проводили при помощи оксиметра Ohaus Starter 300 D (США). По прошествии указанного времени часть особей подвергалась процедуре реоксигенации (барботаж воздухом) с восстановлением исходного уровня кислорода в воде и выдерживалась в данных условиях в течение 24 ч. Жабры моллюсков считаются наиболее чувствительной тканью к условиям водной среды (Soldatov et al., 2014), поэтому они были выбраны в качестве объекта исследования. Образцы жабр получали на 24 и 72 ч эксперимента и после реоксигенации. Из каждой экспериментальной группы (контроль, суточная, трехсуточная гипоксия, реоксигенация) было отобрано по 8 особей на точку. Ткани извлекали на льду и сразу помещали в реагент для лизиса, гомогенизировали с помощью гомогенизатора Tissue Ruptor II (Quagen, Germany) и тут же проводили выделение РНК.

Общую РНК экстрагировали из жаберной ткани с использованием набора реактивов «РНК-ЭКСТРАН» (Синтол, Россия) в соответствии с протоколом производителя. Количество выделенной РНК проверяли на флуориметре Qubit 4.0 (Thermo Fisher Scientific, США). Чистоту полученной РНК определяли по соотношению A260/A280, полученному с помощью нанофотометра Implen (Германия). кДНК синтезировали с использованием набора Mint-2 (Евроген, Россия) в соответствии с протоколом производителя. Обратную транскрипцию проводили в конечном объеме 15 мкл, содержащем 1 мкг очищенной общей РНК. В качестве референсного гена использовали Ef-1. Для выбора праймеров использовали литературные данные и транскрипты генов MDH (КФ 1.1.1.37), OcDH (КФ 1.5.1.11) и РКМ (КФ 2.7.1.40), полученные авторами ранее (Andreyeva et al., 2021). С помощью программы Primer Blast, выбирали праймеры для ампликонов с длиной около 150 н.п. (табл. 1). Эффективность каждой пары праймеров отображена в табл. 2.

 

Таблица 1. Перечень праймеров, использованных в данной работе

Ген

Прямой праймер (5′–3′)

Обратный праймер (5′–3′)

Длина ампликона

Ссылка

Ef-1

CCTCCCACCATCAAGACCCA

GGCTGGAGCAAAGGTAACAAC

145

Giannetto et al., 2015

OcDH

CAGCATTTGCTCACGCTCAG

AACTGCTGGCTTTGTCACCA

135

Vázquez-Dorado et al., 2011

PKM

CAAAGCGGCTGTATGTGTGG

ACATCTACAACATCTGATGGCTTTG

159

Данная работа

MDH

TCCAGCCAATACCAACGCAT

ACACCTAGCTTGGCTGCA AT

126

Данная работа

 

Таблица 2. Эффективность праймеров (%)

Условия эксперимента

Ef-1

MDG

ODH

PK

Контроль

97.7

94.5

90.2

98.0

Гипоксия, 24 ч

110.2

90.9

90.4

92.0

Гипоксия, 72 ч

93.0

101.0

99.0

95.6

Реоксигенация

92.6

96.6

96.7

94.6

 

Количественный ПЦР-анализ в реальном времени (RT-qPCR) проводили на амплификаторе ПЦР в реальном времени CFX96 (BioRad, США) с использованием набора qPCRmix-HS с красителем SYBR Green I (Евроген, Россия). Реакционная смесь (общий объем 25 мкл) содержала 1 мкл кДНК, по 1 мкл каждого праймера с концентрацией 10 мкМ, 5 мкл ПЦР-смеси qPCRmix-HS SYBR (Евроген, Россия) и 17 мкл деионизованной воды (MilliQ). Протокол реакции состоял из 3-минутной начальной денатурации при 95 °C, за которой следовали 44 цикла: 30 с при 95°C, 30 с при 60°C и 30 с при 72°C. Также была выполнена кривая плавления продуктов ПЦР (65–95°C (0.5°C/с)), чтобы исключить наличие других продуктов. Все реакции проводили в трех технических повторностях. Для каждого эксперимента использовали отрицательный контроль без матрицы. Эффективность амплификации определяли путем построения стандартной кривой с последовательными разведениями кДНК. Для каждого измерения определяли пороговое значение Ct. Для расчета относительной экспрессии использовали метод ∆∆Ct (Livak, Schmittgen, 2001).

Статистические сравнения выполнены на основе непараметрического U-критерия Манна-Уитни. Результаты представлены как M±m. В работе использовали стандартный пакет SigmaPlot (версия 12.5).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты исследований представлены на рис. 1. Как видно, значительные изменения уровня экспрессии отмечались со стороны генов MDH и OcDH. В обоих случаях в условиях гипоксии (24 и 72 ч) отмечали рост значений соответственно в 2 и 3 раза (p<0.05). После реоксигенации уровень экспрессии OcDH восстанавливался до исходных значений, тогда как экспрессия MDH сохранялась на относительно высоком уровне. При этом повышалась вариабельность регистрируемых значений.

 

Рис. 1. Экспрессия генов MDH, OсDH и РКM в жабрах средиземноморской мидии в условиях гипоксии (2.2 мгО2 л–1) и после реоксигенации. Значения на оси ординат показаны изменения кратности (Fold change). * – достоверно по отношению к контролю (непараметрический критерий Манна-Уитни), p < 0.05.

 

Сведения об экспрессии OсDH весьма ограничены. В работах (Kimura et al., 2004; Vázquez-Dorado et al., 2011) описывается лишь клонирование и гетерологичная экспрессия OcDH из гепатопанкреаса M. galloprovincialis.

Природа чувствительности экспрессии гена OсDH к содержанию кислорода в воде показана впервые. По-видимому, она определяется синтезом HIF-1α фактора (hypoxia inducible factor). Близкий к млекопитающим по структуре и функциональным характеристикам белковый фактор (766 аминокислот) впервые был идентифицирован и в плазме крови форелей (Salmo gairdneri), содержащейся в условиях гипоксии (5% насыщения воды кислородом) (Soitamo et al., 2001). Отмечено, что его продукция всегда повышалась в условиях гипоксии и у других рыб (Heise et al., 2006; Ju et al., 2007). Это происходило на фоне роста активности лактатдегидрогеназы (LDH), что отражало усиление процессов анаэробиоза в тканях (Rees et al., 2001). HIF-1α был идентифицирован и у представителей рода Mytilus (Giannetto et al., 2015). OсDH фактически является конкурентом LDH за гликолитический пируват в тканевых структурах моллюска. Его активность почти в 15 раз выше (Storey, Dando, 1982). На этом основании можно предположить, что выработка HIF-1α регулирует экспрессию гена OсDH.

Другим результатом настоящей работы явилось обнаружение роста экспрессии гена MDH, которая, в отличие от OcDH, не подавлялась в условиях реоксигенации. Показано, что ген данного фермента активно экспрессируется в тканях средиземноморской мидии (Soldatov et al., 2023). Известно, что MDH катализирует как прямую, так и обратную реакцию превращения S-малата. Этот процесс является элементом многих метаболических путей, протекающих как в аэробных, так и анаэробных условиях (Chang, Tong, 2003). Благодаря MDH реализуются глюкозо-сукцинатная и аспартат-сукцинатная реакции, которые более эффективны в условиях анаэробиоза, в сравнении с глюкозо-опинным и глюкозо-лактатным направлениями метаболизма (Livingstone, 1991). Эти процессы достаточно инерционны. В этом, по-видимому, следует усматривать отсутствие прямой зависимости экспрессии гена MDH от содержания кислорода.

Экспрессия РКM в настоящих экспериментах не изменялась (рис. 1). Отмечена даже некоторая тенденция на подавление данного процесса. Известно, что в условиях внешнего дефицита кислорода активность РКM понижается. Это показано для морских гребешков, ряда брюхоногих моллюсков и отражает усиление анаэробных процессов в их тканевых структурах, в которых активное участие принимает MDH (Sokolova, Pörtner, 2001; Van Hellemond et al., 2003). Эта информация согласуется с данными по экспрессии MDH и РКM, рассмотренными выше.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Из представленных материалов следует, что условия острой гипоксии сопровождаются повышением уровня экспрессии генов OcDH и MDH в жабрах средиземноморской мидии при отсутствии изменений со стороны гена РКM. При этом экспрессия OcDH проявляет чувствительность к содержанию кислорода в среде. Обнаруженные изменения направлены на повышение эффективности анаэробных процессов в ткани в условиях внешнего дефицита кислорода.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ стандартов

Этические нормы: все процедуры с использованием моллюсков были выполнены в соответствии с Директивой Совета Европейских сообществ (2010/63/EU) и одобрены местным учреждением по уходу и использованию животных (протокол № 4/23 от 26.10.2023).

ФИНАНСИРОВАНИЕ

Работа выполнена в рамках государственной программы АААА-А18-118021490093-4.

×

Авторлар туралы

A. Lantushenko

Sevastopol State University

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Ресей, Universitetskaya str. 33, Sevastopol 299053

A. Kohan

Federal Research Center “A.O. Kovalevsky Institute of Biology of the South Seas of the Russian Academy of Sciences”

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Ресей, Nakhimov Avenue, Sevastopol, 2299011

A. Soldatov

Sevastopol State University; Federal Research Center “A.O. Kovalevsky Institute of Biology of the South Seas of the Russian Academy of Sciences”

Хат алмасуға жауапты Автор.
Email: alekssoldatov@yandex.ru
Ресей, Universitetskaya str. 33, Sevastopol 299053; Nakhimov Avenue, Sevastopol, 2299011

I. Degtyar

Sevastopol State University

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Ресей, Universitetskaya str. 33, Sevastopol 299053

A. Andreeva

Federal Research Center “A.O. Kovalevsky Institute of Biology of the South Seas of the Russian Academy of Sciences”

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Ресей, Nakhimov Avenue, Sevastopol, 2299011

Әдебиет тізімі

  1. Allcock A. L., Strugnell J. M., Prodohl P., Piatkowski U., Vecchione M. A new species of Parledoene (Cephalopoda: Octopodidae) from Antarctic Peninsula Waters // Polar Biology. 2007. V. 30. P. 883–893.
  2. Andreyeva, A. Y., Gostyukhina, O. L., Kladchenko, E. S., Afonnikov, D. A., Rasskazov, D. A., Lantushenko, A. O., & Vodiasova, E. A. Hypoxia exerts oxidative stress and changes in expression of antioxidant enzyme genes in gills of Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) // Marine Biology Research. 2021. V. 17. Iss. 4. P. 369-379.
  3. Bacchiocchi S., Principato G. Mitochondrial contribution to metabolic changes in the digestive gland of Mytilus galloprovincialis during anaerobiosis // J. Exp. Zool. 2000. V. 286. Iss. 2. P. 107-113. https://doi.org/10.1002/(sici)1097-010x(20000201)286:2< 107::aid-jez1>3.0.co;2-8.
  4. Buck L. T. Succinate and alanine as anaerobic end-products in the diving turtle (Chrysemys picta bellii) // Comparative Biochemistry and Physiology Part B Biochemistry and Molecular Biology. 2000. V. 126. Iss. 3. P. 409–413. https://doi.org/10.1016/S0305-0491(00)00215-7
  5. Chang G. G., Tong L. Structure and function of malic enzymes, a new class of oxidative decarboxylases // Biochemistry. 2003. V. 42. No. 44. P. 12721–12733. https://doi.org/10.1021/bi035251+
  6. Chew S. F., Gan J., Ip Y. K. Nitrogen metabolism and excretion in the swamp eel, Monopterus albus, during 6 or 40 days of estivation in mud // Physiol. Biochem. Zool. 2005. V. 78. No 4. P. 620–629. https://doi.org/10.1086/430233
  7. Endo N., Kan-no N., Nagahisa E. Purification, characterization, and cDNA cloning of opine dehydrogenases from the polychaete rock worm Marphysa sanguinea // Comp. Biochem. Physiol. B. 2007. V. 14. P. 293–307.
  8. Giannetto A., Maisano M., Cappello T., Oliva S., Parrino V., Natalotto A., De Marco G., Barberi C., Romeo O., Mauceri A., Fasulo S. Hypoxia-Inducible Factor α and Hif-prolyl Hydroxylase Characterization and Gene Expression in Short-Time Air-Exposed Mytilus galloprovincialis // Mar. Biotechnol. 2015. V. 17. Iss. 6. P. 3–16. https://doi.org/10.1007/s10126-015-9655-7
  9. Gosling E. Ecological genetics of the mussels Mytilus edulis and M. galloprovincialis on Irish coasts // Marine Ecology Progress Series. 1981. V. 4. No 2. P. 221–227. https://doi.org/10.3354/meps004221
  10. Heise K., Puntarulo S., Nikinmaa M., Lucassen M., Portner H. O., Abele D. Oxidative stress and HIF-1 DNA binding during stressful cold exposure and recovery in the North Sea eelpout (Zoarces viviparus) // Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2006. V. 143. No 4. P. 494–503. https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2006.01.014.
  11. Hollenbeck C. M., Johnston I. A. Genomic Tools and Selective Breeding in Molluscs // Front. Genet. 2018. V. 9. P. 1–15. https://doi.org/10.3389/fgene.2018.00253
  12. Ju Z., Wells M. C., Heater S. J., Walter R. B. Multiple tissue gene expression analyses in Japanese medaka (Oryzias latipes) exposed to hypoxia // Comp. Biochem. Physiol. C. 2007. V. 145. No 1. P. 134–144. https://doi.org/10.1016/j.cbpc.2006.06.012
  13. Karstensen J., Stramma L., Visbeck M. Oxygen minimum zones in the eastern tropical Atlantic and Pacific Oceans // Prog. Oceanogr. 2008. V. 77. P. 331–350. https://doi.org/10.1016/j.pocean.2007.05.009
  14. Kimura T., Nakano T., Yamaguchi T. et al. Complementary DNA Cloning and Molecular Evolution of Opine Dehydrogenases in Some Marine Invertebrates // October 2004 Marine Biotechnology. 2004. V. 6. Iss. 5. P. 493–502. https://doi.org/10.1007/s10126-004-2700-6
  15. Le Moullac G., Bacca H., Huvet A., Moal J., Pouvreau S., Van Wormhoudt A. Transcriptional regulation of pyruvate kinase and phosphoenolpyruvate carboxykinase in the adductor muscle of the oyster Crassostrea gigas during prolonged hypoxia // J. Exp. Zool. A Ecol. Genet. Physiol. 2007. V. 307A. Iss. 7. P. 371–382. https://doi.org/10.1002/jez.390
  16. Livak, K. J., Schmittgen, T. D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2− ΔΔCT method // Methods. 2001. V. 25. Iss. 4, P. 402–408. https://doi.org/10.1006/meth.2001.1262
  17. Livingstone D. R. Origins and evolution of pathways of anaerobic metabolism in the animal kingdom // Am. Zool. 1991. V. 31. P. 522–534.
  18. Paulmier A., Ruiz-Pino D. Oxygen minimum zones in the modern ocean // Prog. Oceanogr. 2009. V. 80. P. 113–128. https://doi.org/10.1016/j.pocean.2008.08.001
  19. Rabalais N. N., Cai W.-J., Carstensen J. Eutrophication-driven deoxygenation in the coast-al ocean // Oceanography. 2014. V. 27. No 1. P. 172–183. https://doi.org/10.5670/oceanog.2014.21.
  20. Rees B. B., Bowman J. A.L., Schulte P. M. Structure and sequence conservation of a putative hypoxia response element in the lactate dehydrogenase-B gene of Fundulus // Biol. Bull. 2001. V. 200. P. 247–251. https://doi.org/10.2307/1543505
  21. Soitamo A. J., Raabergh C. M.I., Gassmann M., Sistonen L., Nikinmaa M. Characterization of a Hypoxia-inducible Factor (HIF-1) from Rainbow Trout: Accumulation of protein occurs at normal venous oxygen tension // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. No 23. P. 19699–19705. https://doi.org/10.1074/jbc.M009057200.
  22. Sokolova I. M., Pörtner H. O. Temperature effects on key metabolic enzymes in Littorina saxatilis and L. obtusata from different latitudes and shore levels // Mar. Biol. 2001. V. 139. P. 113–126.
  23. Soldatov A. A., Andreenko T. I., Golovina I. V., Stolbov A. Y. Peculiarities of organization of tissue metabolism in molluscs with different tolerance to external hypoxia // J. Evol. Biochem. Physiol. 2010. V. 46. No 4. P. 341–349. https://doi.org/10.1134/S0022093010040022
  24. Soldatov A. A., Andreenko T. I., Sysoeva I. V., Sysoev A. A. Tissue specificity of metabolism in the bivalve mollusc Anadara inaequivalvis Br. under conditions of experimental anoxia // J. Evol. Biochem. Physiol. 2009. V. 45. No 3. P. 349–355. https://doi.org/10.1134/S002209300903003X
  25. Soldatov A. A., Golovina I. V., Lantushenko A. O., Kokhan A. S., Sysoeva I. V., Sysoev A. A., Kolesnikova E. E. Adenylate System State, Malate Dehydrogenase Activity and Expression Level in Tissues of Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819 // Thalassas: An International Journal of Marine Sciences. 2023. V. 39. P. 739–747. https://doi.org/10.1007/s41208-023-00563-4
  26. Soldatov A. A., Gostyukhina O. L., Golovina I. V. Functional states of antioxidant enzymatic complex of tissues of Mytillus galloprovincialis Lam. under conditions of oxidative stress // J. Evol. Biochem. Physiol. 2014. V. 50. Iss. 3. P. 206–214. https://doi.org/10.1134/S0022093014030028
  27. Storey K. B., Dando P. R. Substrate specificities of octopine dehydrogenases from marine invertebrates // Comp. Biochem. Physiol. B Comp. Biochem. 1982. V. 73. P. 521–528. https://doi.org/10.1016/0305-0491(82)90069-4
  28. Storey K. B., Storey J. M. Metabolic rate depression in animals: transcriptional and translational controls // Biol. Rev. 2004. V. 79. P. 207–233. https://doi.org/10.1017/s1464793103006195
  29. St-Pierre J., Tattersall G. J., Boutilier R. G. Metabolic depression and enhanced O2 affinity of mitochondria in hypoxic hypometabolism // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2000. V. 279. Iss. 4. P. R1205–R1214. https://doi.org/10.1152/ajpregu.2000.279.4.R1205
  30. Strugnell J. M., Collins M. A., Allcock A. L. Molecular evolutionary relationships of the octopodid genus Thaumeledone (Cephalopoda: Octopodidae) from the Southern Ocean // Antarctic Science. 2008. V. 20. P. 245–251.
  31. Van Hellemond J. J., Van der Klei A., Van Weelden S. W.H. Tielens A. G.M. Biochemical and evolutionary aspects of anaerobically functioning mitochondria // Philos. Trans. R. Soc. B Biol. Sci. 2003. V. 358. P. 205–215. https://doi.org/10.1098/rstb.2002.1182
  32. Vázquez-Dorado S., Sanjuan A., Comesaña A. S., Carlos A. Identification of octopine dehydrogenase from Mytilus galloprovincialis // Comparative Biochemistry and Physiology Part B. 2011. V. 160. P. 94–103. https://doi.org/10.1016/j.cbpb.2011.07.003
  33. Vázquez-Dorado S., De Carlos A., Comesaña A. S., Andrés Sanjuán A. Phylogenetic comparison of opine dehydrogenase sequences from marine invertebrates // Biochem. Genet. 2013. V. 51. Iss. 1–2. P. 154–65. doi: 10.1007/s10528-012-9551-z
  34. Zammit V. A. Possible relationship between energy metabolism of muscle and oxygen binding characteristics of haemocyanin of cephalopods // J. Mar. Biol. Assoc. UK. 1978. V. 58. P. 421–424. doi: 10.1017/S0025315400028083

Қосымша файлдар

Қосымша файлдар
Әрекет
1. JATS XML
Жүктеу
2. Fig. 1. Expression of MDH, OcDH and RCM genes in the gills of the Mediterranean mussel under hypoxia (2.2 mgO2 l–1) and after reoxygenation. The values on the ordinate axis show the Fold change. * – reliably relative to the control (nonparametric Mann-Whitney test), p < 0.05.

Жүктеу (68KB)
Метадеректер

© Russian Academy of Sciences, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».