The Response of Mouse Microglia Cells SIM-A9 to γ-Radiation

封面

如何引用文章

全文:

详细

Purpose: Characterization of the response of mouse microglia cells of the SIM-A9 line to the γ-irradiation. Material and methods: Irradiation of the cells in suspension was carried out using a GUT-200M installation (cobalt-60 γ-radiation source). The radiosensitivity of cells was assessed by the number of surviving cells and their clonogenic activity. The effect of γ-radiation on the phenotype and expression of colony-stimulating growth factor receptor-1 and of epidermal growth factor, which are required to stimulate microglial cells proliferation, was studied using flow cytometry after staining the cells with appropriate fluorescently labeled CD11b, CD45, TMEM119, CSF-1R и EGFR antibodies. Analysis of the relative expression of mRNA genes for the cytokines IL-1β, IL-6, and TNFα in response to γ-radiation was performed using RT-PCR. Statistical analysis was carried out using Student’s t-test in the Origin program. Results: High radiosensitivity of SIM-A9 cells has been demonstrated. When analyzing the dependence of the clonogenic activity of cells on the radiation dose, it was shown that the D37 value for these cells was equal to 1 Gy. Irradiation caused a cell cycle block in the G0/G1 phase with a decrease in the proportion of cells in the S– and G2/M-phases. The cell death of irradiated SIM-A9 cells occurred by apoptosis. The peculiarity of SIM-A9 cells compared to brain microglia is their phenotype of activated microglia CD11b+/CD45high with an insignificant content of CD11b+/CD45-/low cells and no change in it after irradiation. An increase in the level of mRNA expression of the proinflammatory cytokine genes IL-1β, IL-6 and TNFα in response to γ-irradiation of SIM-A9 cells was shown, which reflects their activation and corresponds to the response of brain microglia cells during total mice irradiation and local cranial irradiation. Conclusion: The obtained patterns indicate the possibility of using the SIM-A cell line in model radiobiological studies, including the study of intercellular interactions of brain cells of different types with microglia cells.

作者简介

D. Shaposhnikova

National Research Center "Kurchatov Institute"

Email: dasha-shap13@mail.ru
Moscow

E. Moskaleva

National Research Center "Kurchatov Institute"

Email: dasha-shap13@mail.ru
Moscow

O. Vysotskaya

National Research Center "Kurchatov Institute"

Email: dasha-shap13@mail.ru
Moscow

O. Komova

Joint Institute for Nuclear Research

Email: dasha-shap13@mail.ru
Dubna

I. Koshlan

Joint Institute for Nuclear Research

Email: dasha-shap13@mail.ru
Dubna

K. Kondratiev

National Research Center "Kurchatov Institute"

Email: dasha-shap13@mail.ru
Moscow

参考

  1. Greene-Schloesser D., Robbins M.E. Radiation-Induced Cognitive Impairment-from Bench to Bedside. Neuro Oncol. 2012;14;4:iv37-iv44 doi: 10.1093/neuonc/nos196.
  2. Askew K., Li K., Olmos-Alonso A., Garcia-Moreno F., Liang Y., Richardson P., Tipton T., Chapman M.A., Riecken K., Beccari S., Sierra A., Molnár Z., Cragg M.S., Garaschuk O., Perry V.H., Gomez-Nicola D. Coupled Proliferation and Apoptosis Maintain the Rapid Turnover of Microglia in the Adult Brain. Cell Rep. 2017;18;2:391-405. doi: 10.1016/j.celrep.2016.12.041.
  3. Chitu V., Gokhan Ş., Nandi S., Mehler M.F., Stanley E.R. Emerging Roles for CSF-1 Receptor and its Ligands in the Nervous System. Trends Neurosci. 2016;39;6:378-393. doi: 10.1016/j.tins.2016.03.005.
  4. Liu Q., Huang Y., Duan M., Yang Q., Ren B., Tang F. Microglia as Therapeutic Target for Radiation-Induced Brain Injury. Int J Mol Sci. 2022;23;15:82-86. doi: 10.3390/ijms23158286.
  5. Kreisel T., Wolf B., Keshet E., Licht T. Unique Role for Dentate Gyrus Microglia in Neuroblast Survival and in VEGF-Induced Activation. Glia. 2019;67;4:594-618. doi: 10.1002/glia.23505.
  6. Legroux L., Pittet C.L., Beauseigle D., Deblois G., Prat A., Arbour N. An Optimized Method to Process Mouse CNS to Simultaneously Analyze Neural Cells and Leukocytes by Flow Cytometry. J Neurosci Methods. 2015;247:23-31. doi: 10.1016/j.jneumeth.2015.03.021.
  7. Blasi E., Barluzzi R., Bocchini V., Mazzolla R., Bistoni F. Immortalization of Murine Microglial Cells by a V-Raf/V-Myc Carrying Retrovirus. J Neuroimmunol. 1990;27;2-3:229-237. doi: 10.1016/0165-5728(90)90073-v.
  8. Stansley B., Post J., Hensley K.A Comparative Review of Cell Culture Systems for the Study of Microglial Biology in Alzheimer’s Disease. J Neuroinflammation. 2012;9:115. doi: 10.1186/1742-2094-9-115.
  9. Nagamoto-Combs K., Kulas J., Combs C.K. A Novel Cell Line from Spontaneously Immortalized Murine Microglia. J Neurosci Methods. 2014;.233:187-198. doi: 10.1016/j.jneumeth.2014.05.021.
  10. Franken N.A., Rodermond H.M., Stap J., Haveman J., van Bree C. Clonogenic Assay of Cells in Vitro. Nat Protoc. 2006;1;5:2315-2319. doi: 10.1038/nprot.2006.339.
  11. Rodina A.V., Semochkina Y.P., Vysotskaya O.V., Parfenova A.A., Moskaleva E.Y. Radiation-Induced Neuroinflammation Monitoring by the Level of Peripheral Blood Monocytes with High Expression of Translocator Protein. Int J Radiat Biol. 2023;99;9:1364-1377. doi: 10.1080/09553002.2023.2177765.
  12. Шапошникова Д.А., Москалева Е.Ю., Сёмочкина Ю.П., Высоцкая О.В., Комова О.В., Насонова Е.А., Кошлань И.В. Характеристика клеток микроглии линии SIM-A9 – новые данные // Цитология. 2023.Т.65. №3. С. 259-272 [Shaposhnikova D.A., Moskaleva Ye.Yu., Somochkina Yu.P., Vysotskaya O.V., Komova O.V., Nasonova Ye.A., Koshlan’ I.V. Characteristics of SIM-A9 Microglial Cells – New Data. Tsitologiya = Tsitology. 2023;65;3:259-272 (In Russ.)]. doi: 10.1134/S1990519X23050127.
  13. Родина А.В., Семочкина Ю.П., Ратушняк М.Г., Шуватова В.Г., Посыпанова Г.А., Москалёва Е.Ю. Анализ ориентировочно-исследовательской активности и уровня микроглии у мышей, подвергшихся воздействию γ-излучения в сублетальных дозах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2019. Т.59. №6. С.575-584 [Rodina A.V., Semochkina Yu.P., Ratushnyak M.G., Shuvatova V.G., Posypanova G.A., Moskalova Ye.Yu. Analysis of Exploratory Activity and Microglia Levels in Mice Exposed to Sublethal Doses of Γ-Radiation. Radiatsionnaya Biologiya. Radioekologiya = Radiation Biology. Radioecology. 2019;59;6:575-584 (In Russ.)]. doi: 10.1134/S0869803119060092.
  14. Родина А.В., Семочкина Ю.П., Ратушняк М.Г., Москалева Е.Ю. Динамика изменения субпопуляций клеток микроглии после γ-облучения головы мышей // Вестник ВИТ «ЭРА». 2020. Т.1. №1. С.30-33 [Rodina A.V., Semochkina Yu.P., Ratushnyak M.G., Moskaleva E.Yu. Dynamics of Changes in Microglial Cell Subpopulations after Γ-Irradiation of The Mouse Head. Vestnik VIT «ERA» = Vestnik VIT “ERA”. 2020;1;1:30-33 (In Russ.)].
  15. Жирник А.С., Смирнова О.Д., Сёмочкина Ю.П., Шибаева К.Д., Родина А.В., Ратушняк М.Г., Москалева Е.Ю. Нарушение когнитивных функций и развитие нейровоспаления в отдаленный период после однократного γ-облучения головы мышей // Радиационная биология. Радиоэкология. 2021. Т.61. №1. С.32–43 [Zhirnik A.S., Smirnova O.D., Somochkina Yu.P., Shibayeva K.D., Rodina A.V., Ratushnyak M.G., Moskaleva Ye.Yu. Impairment Of Cognitive Functions and the Development of Neuroinflammation in the Late Period after a Single Γ-Irradiation of the Head of Mice. Radiatsionnaya Biologiya. Radioekologiya = Radiation Biology. Radioecology. 2021;61;1:32–43 (In Russ.)]. doi: 10.31857/S0869803121010112.

补充文件

附件文件
动作
1. JATS XML

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».