Астаксантин снижает кардиотоксичность, вызванную Н2O2 и доксорубицином в клетках кардиомиоцитов линии Н9с2

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Сердечно-сосудистые заболевания представляют собой одну из самых сложных проблем в клинической практике. Астаксантин (АСТ) – это кето-каротиноид (ксантофилл) преимущественно морского происхождения, который способен проникать через клеточную мембрану, локализуясь в митохондриях, и предотвращать митохондриальную дисфункцию. В настоящем исследовании изучено влияние астаксантина на гибель кардиомиоцитов линии H9c2, вызванную цитотоксическим действием пероксида водорода (Н2О2) и доксорубицина. С использованием методов спектрофотометрии, спектрофлуометрии, вестерн-блоттинга показано, что обработка клеток АСТ способствовала повышению числа устойчивых к действию Н2О2 и доксорубицина клеток H9c2 на фоне сохранения величины их трансмембранного потенциала митохондрий, снижения внутриклеточной продукции активных форм кислорода и увеличения внутриклеточного содержания маркеров митофагии PINK1, Parkin и прохибитина 2. Полученные результаты позволяют предположить, что использование AСТ может быть высокоэффективным способом для профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Р. Р. Крестинин

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: ovkres@mail.ru
Руанда, 142290, Пущино, Московская обл.

М. И. Кобякова

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Email: ovkres@mail.ru
Россия, 142290, Пущино, Московская обл.

Ю. Л. Бабурина

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Email: ovkres@mail.ru
Россия, 142290, Пущино, Московская обл.

Л. Д. Сотникова

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Email: ovkres@mail.ru
Россия, 142290, Пущино, Московская обл.

О. В. Крестинина

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Email: ovkres@mail.ru
Россия, 142290, Пущино, Московская обл.

Список литературы

  1. Peoples, J. N., Saraf, A., Ghazal, N., Pham, T. T., and Kwong, J. Q. (2019) Mitochondrial dysfunction and oxidative stress in heart disease, Exp. Mol. Med., 51, 1-13, https://doi.org/10.1038/s12276-019-0355-7.
  2. Bullon, P., Newman, H. N., and Battino, M. (2014) Obesity, diabetes mellitus, atherosclerosis and chronic periodontitis: a shared pathology via oxidative stress and mitochondrial dysfunction? Periodontol. 2000, 64, 139-153, https://doi.org/10.1111/j.1600-0757.2012.00455.x.
  3. Hernandez-Aguilera, A., Rull, A., Rodriguez-Gallego, E., Riera-Borrull, M., Luciano-Mateo, F., Camps, J., Menendez, J. A., and Joven, J. (2013) Mitochondrial dysfunction: a basic mechanism in inflammation-related non-communicable diseases and therapeutic opportunities, Mediators Inflamm., 2013, 135698, https://doi.org/10.1155/ 2013/135698.
  4. Kim, S. H., and Kim, H. (2018) Inhibitory effect of astaxanthin on oxidative stress-induced mitochondrial dysfunction-a mini-review, Nutrients, 10, https://doi.org/10.3390/nu10091137.
  5. Griffiths, E. J. (2012) Mitochondria and heart disease, Adv. Exp. Med. Biol., 942, 249-267, https://doi.org/10.1007/ 978-94-007-2869-1_11.
  6. Tsutsui, H., Kinugawa, S., and Matsushima, S. (2008) Oxidative stress and mitochondrial DNA damage in heart failure, Circ. J., 72 Suppl A, A31-A37, https://doi.org/10.1253/circj.cj-08-0014.
  7. Li, W., He, P., Huang, Y., Li, Y. F., Lu, J., Li, M., Kurihara, H., Luo, Z., Meng, T., Onishi, M., Ma, C., Jiang, L., Hu, Y., Gong, Q., Zhu, D., Xu, Y., Liu, R., Liu, L., Yi, C., Zhu, Y., Ma, N., Okamoto, K., Xie, Z., Liu, J., He, R.-R., and Feng, D. (2021) Selective autophagy of intracellular organelles: recent research advances, Theranostics, 11, 222-256, https://doi.org/10.7150/thno.49860.
  8. Ashrafi, G., and Schwarz, T. L. (2013) The pathways of mitophagy for quality control and clearance of mitochondria, Cell Death Differ., 20, 31-42, https://doi.org/10.1038/cdd.2012.81.
  9. Vives-Bauza, C., Zhou, C., Huang, Y., Cui, M., de Vries, R. L., Kim, J., May, J., Tocilescu, M. A., Liu, W., Ko, H. S., Magrane, J., Moore, D. J., Dawson, V. L., Grailhe, R., Dawson, T. M., Li, C., Tieu, K., and Przedborski, S. (2010) PINK1-dependent recruitment of Parkin to mitochondria in mitophagy, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 107, 378-383, https://doi.org/10.1073/pnas.0911187107.
  10. Chen, M., Chen, Z., Wang, Y., Tan, Z., Zhu, C., Li, Y., Han, Z., Chen, L., Gao, R., Liu, L., and Chen, Q. (2016) Mitophagy receptor FUNDC1 regulates mitochondrial dynamics and mitophagy, Autophagy, 12, 689-702, https://doi.org/10.1080/15548627.2016.1151580.
  11. Zhu, Y., Massen, S., Terenzio, M., Lang, V., Chen-Lindner, S., Eils, R., Novak, I., Dikic, I., Hamacher-Brady, A., and Brady, N. R. (2013) Modulation of serines 17 and 24 in the LC3-interacting region of Bnip3 determines pro-survival mitophagy versus apoptosis, J. Biol. Chem., 288, 1099-1113, https://doi.org/10.1074/jbc. M112.399345.
  12. Wei, Y., Chiang, W. C., Sumpter, R., Jr., Mishra, P., and Levine, B. (2017) Prohibitin 2 is an inner mitochondrial membrane mitophagy receptor, Cell, 168, 224-238.e210, https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.11.042.
  13. Fassett, R. G., and Coombes, J. S. (2011) Astaxanthin: a potential therapeutic agent in cardiovascular disease, Mar. Drugs, 9, 447-465, https://doi.org/10.3390/md9030447.
  14. Song, X., Wang, B., Lin, S., Jing, L., Mao, C., Xu, P., Lv, C., Liu, W., and Zuo, J. (2014) Astaxanthin inhibits apoptosis in alveolar epithelial cells type II in vivo and in vitro through the ROS-dependent mitochondrial signalling pathway, J. Cell Mol. Med., 18, 2198-2212, https://doi.org/10.1111/jcmm.12347.
  15. Fan, C. D., Sun, J. Y., Fu, X. T., Hou, Y. J., Li, Y., Yang, M. F., Fu, X. Y., and Sun, B. L. (2017) Astaxanthin attenuates homocysteine-induced cardiotoxicity in vitro and in vivo by inhibiting mitochondrial dysfunction and oxidative damage, Front. Physiol., 8, 1041, https://doi.org/10.3389/fphys.2017.01041.
  16. Liu, X., Shibata, T., Hisaka, S., and Osawa, T. (2009) Astaxanthin inhibits reactive oxygen species-mediated cellular toxicity in dopaminergic SH-SY5Y cells via mitochondria-targeted protective mechanism, Brain Res., 1254, 18-27, https://doi.org/10.1016/j.brainres.2008.11.076.
  17. Akila, P., Asaikumar, L., and Vennila, L. (2017) Chlorogenic acid ameliorates isoproterenol-induced myocardial injury in rats by stabilizing mitochondrial and lysosomal enzymes, Biomed. Pharmacother., 85, 582-591, https://doi.org/10.1016/j.biopha.2016.11.067.
  18. Feng, W., and Li, W. (2010) The study of ISO induced heart failure rat model, Exp. Mol. Pathol., 88, 299-304, https://doi.org/10.1016/j.yexmp.2009.10.011.
  19. Odinokova, I., Baburina, Y., Kruglov, A., Fadeeva, I., Zvyagina, A., Sotnikova, L., Akatov, V., and Krestinina, O. (2018) Effect of melatonin on rat heart mitochondria in acute heart failure in aged rats, Int. J. Mol. Sci., 19, https://doi.org/10.3390/ijms19061555.
  20. Baburina, Y., Krestinin, R., Odinokova, I., Sotnikova, L., Kruglov, A., and Krestinina, O. (2019) Astaxanthin inhibits mitochondrial permeability transition pore opening in rat heart mitochondria, Antioxidants (Basel), 8, https://doi.org/10.3390/antiox8120576.
  21. Krestinin, R., Baburina, Y., Odinokova, I., Kruglov, A., Fadeeva, I., Zvyagina, A., Sotnikova, L., and Krestinina, O. (2020) Isoproterenol-induced permeability transition pore-related dysfunction of heart mitochondria is attenuated by astaxanthin, Biomedicines, 8, 437, https://doi.org/10.3390/biomedicines8100437.
  22. Krestinina, O., Baburina, Y., and Krestinin, R. (2021) Mitochondrion as a target of astaxanthin therapy in heart failure, Int. J. Mol. Sci., 22, https://doi.org/10.3390/ijms22157964.
  23. Krestinina, O., Baburina, Y., Krestinin, R., Odinokova, I., Fadeeva, I., and Sotnikova, L. (2020) Astaxanthin prevents mitochondrial impairment induced by isoproterenol in isolated rat heart mitochondria, Antioxidants (Basel), 9, 262, https://doi.org/10.3390/antiox9030262.
  24. Kim, D. E., Kim, B., Shin, H. S., Kwon, H. J., and Park, E. S. (2014) The protective effect of hispidin against hydrogen peroxide-induced apoptosis in H9c2 cardiomyoblast cells through Akt/GSK-3beta and ERK1/2 signaling pathway, Exp. Cell Res., 327, 264-275, https://doi.org/10.1016/j.yexcr.2014.07.037.
  25. Carvalho, C., Santos, R. X., Cardoso, S., Correia, S., Oliveira, P. J., Santos, M. S., and Moreira, P. I. (2009) Doxorubicin: the good, the bad and the ugly effect, Curr. Med. Chem., 16, 3267-3285, https://doi.org/10.2174/ 092986709788803312.
  26. Kruger, N. J. (1994) The Bradford method for protein quantitation, Methods Mol. Biol., 32, 9-15, https:// doi.org/10.1385/0-89603-268-X:9.
  27. Baburina, Y., Krestinin, R., Fedorov, D., Odinokova, I., Pershina, E., Sotnikova, L., and Krestinina, O. (2022) The improvement of functional state of brain mitochondria with astaxanthin in rats after heart failure, Int. J. Mol. Sci., 24, https://doi.org/10.3390/ijms24010031.
  28. Крестинин Р. Р., Бабурина Ю. Л., Одинокова И. В., Сотникова Л. Д., Крестинина О. В. (2024) Астаксантин предотвращает дисрегуляцию митохондриальной динамики в митохондриях мозга крыс, индуцированную изопротеренолом, Биофизика, 69, 90-102.
  29. Carpenter, K. L., Kirkpatrick, P. J., Weissberg, P. L., Challis, I. R., Dennis, I. F., Freeman, M. A., and Mitchinson, M. J. (2003) Oral alpha-tocopherol supplementation inhibits lipid oxidation in established human atherosclerotic lesions, Free Radic Res., 37, 1235-1244, https://doi.org/10.1080/10715760310001604143.
  30. Ellingsen, I., Seljeflot, I., Arnesen, H., and Tonstad, S. (2009) Vitamin C consumption is associated with less progression in carotid intima media thickness in elderly men: a 3-year intervention study, Nutr. Metab. Cardiovasc. Dis., 19, 8-14, https://doi.org/10.1016/j.numecd.2008.01.006.
  31. Xuan, R. R., Niu, T. T., and Chen, H. M. (2016) Astaxanthin blocks preeclampsia progression by suppressing oxidative stress and inflammation, Mol. Med. Rep., 14, 2697-2704, https://doi.org/10.3892/mmr. 2016.5569.
  32. Krestinin, R., Baburina, Y., Odinokova, I., Kruglov, A., Sotnikova, L., and Krestinina, O. (2023) The effect of astaxanthin on mitochondrial dynamics in rat heart mitochondria under iso-induced injury, Antioxidants (Basel), 12, https://doi.org/10.3390/antiox12061247.
  33. Krestinina, O., Odinokova, I., Sotnikova, L., Krestinin, R., Zvyagina, A., and Baburina, Y. (2022) Astaxanthin is able to prevent alcohol-induced dysfunction of liver mitochondria, Antioxidants (Basel), 11, 2019, https:// doi.org/10.3390/antiox11102019.
  34. Abdelzaher, L. A., Imaizumi, T., Suzuki, T., Tomita, K., Takashina, M., and Hattori, Y. (2016) Astaxanthin alleviates oxidative stress insults-related derangements in human vascular endothelial cells exposed to glucose fluctuations, Life Sci., 150, 24-31, https://doi.org/10.1016/j.lfs.2016.02.087.
  35. Mijaljica, D., Prescott, M., and Devenish, R. (2014) Mitophagy: An Overview, in Autophagy: Cancer, Other Pathologies, Inflammation, Immunity, Infection, and Aging, Academic Press, pp. 103-116.
  36. Lazarou, M., Jin, S. M., Kane, L. A., and Youle, R. J. (2012) Role of PINK1 binding to the TOM complex and alternate intracellular membranes in recruitment and activation of the E3 ligase Parkin, Dev. Cell, 22, 320-333, https://doi.org/10.1016/j.devcel.2011.12.014.
  37. Jin, S. M., Lazarou, M., Wang, C., Kane, L. A., Narendra, D. P., and Youle, R. J. (2010) Mitochondrial membrane potential regulates PINK1 import and proteolytic destabilization by PARL, J. Cell Biol., 191, 933-942, https:// doi.org/10.1083/jcb.201008084.
  38. Narendra, D., Tanaka, A., Suen, D. F., and Youle, R. J. (2008) Parkin is recruited selectively to impaired mitochondria and promotes their autophagy, J. Cell Biol., 183, 795-803, https://doi.org/10.1083/jcb.200809125.
  39. Billia, F., Hauck, L., Konecny, F., Rao, V., Shen, J., and Mak, T. W. (2011) PTEN-inducible kinase 1 (PINK1)/Park6 is indispensable for normal heart function, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 108, 9572-9577, https://doi.org/10.1073/pnas.1106291108.
  40. Yan, C., Gong, L., Chen, L., Xu, M., Abou-Hamdan, H., Tang, M., Desaubry, L., and Song, Z. (2020) PHB2 (prohibitin 2) promotes PINK1-PRKN/Parkin-dependent mitophagy by the PARL-PGAM5-PINK1 axis, Autophagy, 16, 419-434, https://doi.org/10.1080/15548627.2019.1628520.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Жизнеспособность кардиомиоцитов линии Н9с2 после 24 ч инкубации с АСТ (а), Н2О2 (б) и Докс (в). Клетки высевали в 96-луночный планшет при плотности 2,5 × 103 клеток на лунку и обрабатывали указанными концентрациями АСТ (а), Н2О2 (б) и Докс (в) в Н9с2 в течение 24 ч. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD) из десяти отдельных экспериментов

Скачать (216KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Зависимость жизнеспособности клеток кардиомиоцитов Н9с2 от концентрации АСТ, Н2О2, Докс и от времени инкубации с АСТ. Инкубация клеток с АСТ производилась в течение 1 (а, г), 4 (б, д) и 6 (в, е) часов. Количество живых клеток интактной культуры (контроль, без обработки препаратами) принималось за 100%. Данные представлены в виде среднего ± SD из шести отдельных экспериментов. Контроль представлял собой необработанные клетки

Скачать (317KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Цитотоксическое действие АСТ и его совместное действие с Н2О2 и Докс в клетках кардиомиоцитов Н9с2. В качестве положительного контроля использовали клетки, обработанные 1%-ным Triton X-100, которые принимали за 100%. а – Число погибших клеток в присутствии различных концентраций АСТ; б – количество погибших клеток при совместном применении АСТ с Н2О2 после 4 ч инкубации с АСТ; в – количество погибших клеток при совместном применении АСТ с Докс после 6 ч инкубации с АСТ. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (n = 8); * р < 0,05 – значимое изменение по сравнению с контролем (интактная культура); # p < 0,05 – значимое изменение по сравнению с соответствующими значениями Н2О2 или Докс

Скачать (290KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Влияние АСТ, Н2О2 и Докс на изменение ΔΨм в клетках кардиомиоцитов Н9с2. Интенсивность флуоресценции интактных клеток использовали в качестве контроля (без обработки препаратами). а – Изменение интенсивности флуоресценции в присутствии АСТ (5 и 10 мкМ) и Н2О2; б – изменение интенсивности флуоресценции в присутствии АСТ (5 и 10 мкМ) и Докс. Валиномицин (250 нМ) использовался как положительный контроль. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (n = 6); * p < 0,05 – значимое изменение по сравнению с соответствующим контролем (необработанные клетки); # р < 0,05 – значимое изменение по сравнению с Н2О2 или Докс

Скачать (206KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Влияние АСТ, Н2О2 и Докс на изменение внутриклеточной продукции АФК в клетках кардиомиоцитов Н9с2. а – Изменение интенсивности флуоресценции в присутствии АСТ (5 и 10 мкМ) и Н2О2; б – изменение интенсивности флуоресценции в присутствии АСТ (5 и 10 мкМ) и Докс. Н2О2 (100 мкМ) использовали как положительный контроль. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (n = 6); * p < 0,05 – значимое изменение по сравнению с контролем (необработанные клетки); # р < 0,05 – значимое изменение по сравнению с Н2О2 или Докс

Скачать (175KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Влияние АСТ (10 мкМ), Н2О2 и Докс на изменение содержание PINK1 (а), Parkin (б) и РНВ2 (в) в клетках кардиомиоцитов Н9с2. Верхняя часть – иммуноокрашивание антителами к PINK1 (а), Parkin (б) и РНВ2 (в); GAPDH использовали как контроль белковой нагрузки. Нижняя часть – диаграммы, количественно отражающие изменения содержания белков, нормированных на GAPDH. Уровень белка в клеточном лизате (без добавок) служил контролем (100%). Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (n = 4); * p < 0,05 – значимое изменение по сравнению с контролем; # р < 0,05 – значимое изменение по сравнению с Н2О2 или Докс

Скачать (228KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».