Создание клеточной линии, селективно продуцирующей функционально активный транспортёр OATP1B1

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Полипептид, транспортирующий органические анионы, OATP1B1 - один из важнейших белков-транспортёров, опосредующий проникновение многих эндогенных веществ и ксенобиотиков в гепатоциты. Для оценки взаимодействия OATP1B1 с различными веществами необходима модельная система, обеспечивающая экспрессию функционального белка. На основе клеток НЕК293 была получена линия НЕК293-OATP1B1, стабильно экспрессирующая ген SLCO1B1, кодирующий транспортёр OATP1B1. Экспрессия гена SLCO1B1 была подтверждена с помощью ПЦР-анализа в реальном времени, а наличие белка - иммунохимически. Функциональность транспортёра была оценена по транспорту аторвастатина, являющегося субстратом OATP1B1. Полученная клеточная линия, селективно продуцирующая функционально активный рекомбинантный транспортёр OATP1B1, может быть использована для его изучения, а также для тестирования лекарственных веществ на принадлежность к субстратам, индукторам и ингибиторам OATP1B1 и оценки рисков межлекарственных взаимодействий.

Об авторах

М. С Котлярова

ФИЦ Биотехнологии РАН, Институт биохимии им. А.Н. Баха

119071 Москва, Россия

А. В Щулькин

Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Минздрава России

390026 Рязань, Россия

П. Д Ерохина

Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Минздрава России

390026 Рязань, Россия

П. Ю Мыльников

Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Минздрава России

390026 Рязань, Россия

Е. Н Якушева

Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Минздрава России

390026 Рязань, Россия

Н. И Надолинская

ФИЦ Биотехнологии РАН, Институт биохимии им. А.Н. Баха

119071 Москва, Россия

М. В Замахаев

ФИЦ Биотехнологии РАН, Институт биохимии им. А.Н. Баха

119071 Москва, Россия

А. В Гончаренко

ФИЦ Биотехнологии РАН, Институт биохимии им. А.Н. Баха

Email: pylaevanna@gmail.com
119071 Москва, Россия

Список литературы

  1. Vasiliou, V., Vasiliou, K., and Nebert, D. W. (2009) Human ATP-binding cassette (ABC) transporter family, Hum. Genomics, 3, 281-290, doi: 10.1186/1479-7364-3-3-281.
  2. Roth, M., Obaidat, A., and Hagenbuch, B. (2012) OATPs, OATs and OCTs: the organic anion and cation transporters of the SLCO and SLC22A gene superfamilies, Br. J. Pharmacol., 165, 1260-1287, doi: 10.1111/j.1476-5381.2011.01724.x.
  3. Liu, X. (2019) SLC family transporters, Adv. Exp. Med. Biol., 1141, 101-202, doi: 10.1007/978-981-13-7647-4_3.
  4. Hsiang, B., Zhu, Y., Wang, Z., Wu, Y., Sasseville, V., Yang, W. P., and Kirchgessner, T. G. (1999) A novel human hepatic organic anion transporting polypeptide (OATP2). Identification of a liver-specific human organic anion transporting polypeptide and identification of rat and human hydroxymethylglutaryl-CoA reductase inhibitor transporters, J. Biol. Chem., 274, 37161-37168, doi: 10.1074/jbc.274.52.37161.
  5. Van de Steeg, E., Stranecky, V., Hartmannova, H., Noskova, L., Hrebicek, M., Wagenaar, E., van Esch, A., de Waart, D. R., Oude Elferink R. P., Kenworthy, K. E., Sticova, E., al-Edreesi, M., Knisely, A. S., Kmoch, S., Jirsa, M., and Schinkel, A. H. (2012) Complete OA TPIBI and OA TPIB3 deficiency causes human Rotor syndrome by interrupting conjugated bilirubin reuptake into the liver, J. Clin. Invest., 122, 519-528, doi: 10.1172/JCI59526.
  6. Campbell, S. D., de Morais, S. M., and Xu, J. J. (2004) Inhibition of human organic anion transporting polypeptide OATP1B1 as a mechanism of drug-induced hyperbilirubinemia, Chem. Biol. Interact., 150, 179-187, doi: 10.1016/j.cbi.2004.08.008.
  7. Neuvonen, P., Niemi, M., and Backman, J. (2006) Drug interactions with lipid-lowering drugs: Mechanisms and clinical relevance, Clin. Pharmacol. Ther., 80, 565-581, doi: 10.1016/j.clpt.2006.09.003.
  8. Chen, C., Stock, J. L., Liu, X., Shi, J., Van Deusen, J. W., DiMattia, D. A., Dullea, R. G., and de Morais, S. M. (2008) Utility of a novel Oatplb2 knockout mouse model for evaluating the role of Oatp1b2 in the hepatic uptake of model compounds, Drug Metab. Dispos., 36, 1840-1845, doi: 10.1124/dmd.108.020594.
  9. Hirano, M., Maeda, K., Shitara, Y., and Sugiyama, Y. (2004) Contribution of OATP2 (OATP1B1) and OATP8 (OATP1B3) to the hepatic uptake of pitavastatin in humans, J. Pharmacol. Exp. Ther., 311, 139-146, doi: 10.1124/jpet.104.068056.
  10. Sudsakorn, S., Bahadduri, P., Fretland, J., and Lu, C. (2020) 2020 FDA drug-drug interaction guidance: a comparison analysis and action plan by pharmaceutical industrial scientists, Curr. Drug Metab., 6, 403-426, doi: 10.2174/1389200221666200620210522.
  11. Drug interaction studies (2022) URL: https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/draft-ich-guideline-m12-drug-interaction-studies-step-2b_en.pdf.
  12. Bradford, M. M. (1976) A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding, Anal. Biochem., 7, 248-254, doi: 10.1006/abio.1976.9999.
  13. Erokhina, P. D., Myl'nikov, P. Y., Ganina, S. O., Konyakhin, E. A., Shchul'kin, A. V., Slepnev, A. A., and Yakusheva, E. N. (2022) Development and validation of the quantitative determination of atorvastatin in HepG2 cell line using high-performance liquid chromatography with mass-spectrometric detection, I. P. Pavlov Russ. Med. Biol. Herald, 30, 149-158, doi: 10.17816/PAVLOVJ100986.
  14. Ahlin, G., Hilgendorf, C., Karlsson, J., Szigyarto, C. A. K., Uhlén, M., and Artursson, P. (2009) Endogenous gene and protein expression of drug-transporting proteins in cell lines routinely used in drug discovery programs, Drug Metab. Dispos., 37, 2275-2283, doi: 10.1124/dmd.109.028654.
  15. Ooi, A., Wong, A., Esau, L., Lemtiri-Chlieh, F., and Gehring, C. (2016) A guide to transient expression of membrane proteins in HEK-293 cells for functional characterization, Front. Physiol., 7, 300, doi: 10.3389/fphys.2016.00300.
  16. Sun, A. Q., Ponamgi, V. M., Boyer, J. L., and Suchy, F. J. (2008) Membrane trafficking of the human organic anion-transporting polypeptide C (hOATPC), Pharm. Res., 25, 463-474, doi: 10.1007/s11095-007-9399-9.
  17. Karlgren, M., Ahlin, G., Bergström, C. A., Svensson, R., Palm, J., and Artursson, P. (2012) In vitro and in silico strategies to identify OATP1B1 inhibitors and predict clinical drug-drug interactions, Pharm. Res., 29, 411-426, doi: 10.1007/s11095-011-0564-9.
  18. Amundsen, R., Christensen, H., Zabihyan, B., and Asberg, A. (2010) Cyclosporine A, but not tacrolimus, shows relevant inhibition of organic anion-transporting protein 1B1-mediated transport of atorvastatin, Drug Metab. Dispos., 38, 1499-1504, doi: 10.1124/dmd.110.032268.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Российская академия наук, 2023

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».