ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ АНТИТЕЛ IgG И IgA МЕТОДОМ ПОЛЯРИЗАЦИИ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ ФЛУОРЕСЦЕНТНО-МЕЧЕННЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ НАНОТЕЛ

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Количественный, быстрый и высокопроизводительный анализ иммуноглобулинов IgG и IgA необходим для определения содержания этих белков и ассоциированных с ними молекул в физиологических жидкостях больных. Анализ этих белков необходим при диагностике дефицита специфических антител в качестве вспомогательного теста для выявления общего вариабельного иммунодефицита, а также для оценки степени риска пациентов с низким уровнем IgA. Определение содержания IgG может помочь при назначении ревакцинации пациентам и поддержки стратегии их лечения, использоваться для мониторинга гуморальной иммунной системы пациента, а также при разработке и последующем производстве большинства терапевтических антител в биофармацевтике. Миниатюрные рекомбинантные однодоменные антитела (нанотела) обладают рядом преимуществ перед классическими антителами, таких как относительная простота их наработки, высокая стабильность в широком диапазоне значений температуры и pH, способность узнавать высокоспецифические конформационные эпитопы целевого белка, а также возможность использования их в качестве зондов для детекции более крупных целевых белков-антигенов в методе поляризации флуоресценции. Получены и охарактеризованы флуоресцентно-меченные нанотела FITC-anti-IgG и FITC-anti-IgA к IgG и IgA человека. Определены Kd комплексов FITC-anti-IgG*IgG и FITC-anti-IgA*IgA, подтверждающие высокую аффинность иммунореагентов. Показана возможность специфичного определения содержания IgG и IgA в сыворотке крови человека в диапазоне 35–120 мкг/мл (для IgA) и 75–260 мкг/мл (для IgG). Протестированы 18 сывороток человека на содержание IgG и IgA, количество антител в образцах подтверждено определением с использованием коммерческих иммуноферментных наборов. Показано, что FITC-anti-IgG и FITC-anti-IgA не взаимодействуют с другими белками человека: альбумином, плазминогеном, фибриногеном, лактоферрином и трансферрином. Тестирование сывороток человека и животных с FITC-anti-IgG и FITC-anti-IgA продемонстрировало специфичное связывание с антисыворотками человека и обезьяны, но не с сыворотками животных: быка, собаки, кошки, кролика и овцы. Таким образом, метод FPIA может быть использован для быстрого и специфичного определения IgG и IgA человека.

Об авторах

Л. И Мухаметова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: liilya106@mail.ru
Россия, Москва

С. А Еремин

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Россия, Москва,

И. В Михура

ФГБУН ГНЦ "Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова" РАН

Россия, Москва

О. С Горяйнова

ФГБУН "Институт биологии гена" РАН

Россия, Москва

Т. И Иванова

ФГБУН "Институт биологии гена" РАН

Россия, Москва

С. В Тиллиб

ФГБУН "Институт биологии гена" РАН

Email: tillib@genebiology.ru
Россия, Москва

Список литературы

  1. Parker A.R., Skold M., Ramsden D.B., Ocejo-Vinyals J.G., López-Hoyos M., Harding S. // Lab. Med. 2017. V. 48. P. 314–325. https://doi.org/10.1093/labmed/lmx058
  2. Bayram R.O. // Turk. J. Med. Sci. 2019. V. 49. P. 497–505. https://doi.org/10.3906/sag-1807-282
  3. Palmeira P., Quinello C., Silveira-Lessa A.L., Zago C.A., Carneiro-Sampaio M. // Clin. Dev. Immunol. 2012. V. 2012. P. 1–13. https://doi.org/10.1155/2012/985646
  4. Breedveld A., Van Egmond M. // Front. Immunol. 2019. V. 10. P. 553. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.00553
  5. Vo Ngoc D.T.L., Krist L., Van Overveld F.J., Rijkers G.T. // Expert Rev. Clin. Immunol. 2017. V. 13. P. 371–382. https://doi.org/10.1080/1744666X.2017.1248410
  6. Zhang H., Li P., Wu D., Xu D., Hou Y., Wang Q., Li M., Li Y., Zeng X., Zhang F., Shi Q. // Medicine (Baltimore). 2015. V. 94. P. e387. https://doi.org/10.1097/MD.0000000000000387
  7. Bonilla F.A., Khan D.A., Ballas Z.K., Chinen J., Frank M.M., Hsu J.T., Keller M., Kobrynski L.J., Komarow H.D., Mazer B., Nelson R.P., Orange J.S., Routes J.M., Shearer W.T., Sorensen R.U., Verbsky J.W., Bernstein D.I., Blessing-Moore J., Lang D., Nicklas R.A., Oppenheimer J., Portnoy J.M., Randolph C.R., Schuller D., Spector S.L., Tilles S., Wallace D. // J. Allergy Clin. Immunol. 2015. V. 136. P. 1186–1205.e1–78. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2015.04.049
  8. Pardo I., Maezato A.M., Callado G.Y., Guffound M.C., Hsieh M.K., Lin V., Kobayashi T., Salinas J.L., Subramanian A., Edmond M.B., Diekema D.J., Rizzo L.V., Marra A.R. // Antimicrob. Steward. Healthc. Epidemiol. 2024. V. 4. P. e152. https://doi.org/10.1017/ash.2024.369
  9. Katoh S., Yasuda I., Kitakawa K., Hamaguchi S., Sando E. // Trop. Med. Health. 2024. V. 52. P. 65. https://doi.org/10.1186/s41182-024-00635-y
  10. Turunen H., Vuorio K.A., Leinikki P.O. // Scand. J. Infect. Dis. 1983. V. 15. P. 307–311. https://doi.org/10.3109/inf.1983.15.issue-3.12
  11. Biologic Therapeutic Drugs: Technologies and Global Market Report 2024, with Company Profiles of Amgen, Abbive, Eli Lilly, Novartis and Glaxosmithline ResearchAndMarkets.com (n.d.). https://www.businesswire.com/news/home/20240212693629/en
  12. Antibody Therapy Market Size, Share, and Trends 2024 to 2034 (n.d.). https://www.precedenceresearch.com/antibody-therapy-market
  13. Nandapalan N., Routledge E., Toms G.L. // J. Med. Virol. 1984. V. 14. P. 285–294. https://doi.org/10.1002/jmv.1890140313
  14. Janwan P., Intapan P.M., Rodpai R., Yamasaki H., Sadaow L., Phosuk I., Sanpool O., Tourtip S., Maleewong W. // PeerJ. 2022. V. 10. P. e14085. https://doi.org/10.7717/peerj.14085
  15. Reymond D., Karmali M.A., Clarke I., Winkler M., Petric M. // J. Clin. Microbiol. 1997. V. 35. P. 609–613. https://doi.org/10.1128/jcm.35.3.609-613.1997
  16. Katikireddy K.R., O'Sullivan F. // In: Gene Expression Profiling / Ed. O'Driscoll L. Humana Press, Totowa, NJ. 2011. P. 155–167. https://doi.org/10.1007/978-1-61779-289-2_11
  17. Tereshin M.N., Melikhova T.D., Eletskaya B.Z., Ivanova E.A., Onoprienko L.V., Makarov D.A., Razumikhin M.V., Myagkikh I.V., Fabrichev I.P., Stepanenko V.N. // Biomolecules. 2024. V. 14. P. 849. https://doi.org/10.3390/biom14070849
  18. Freret D., Willbold D. // PLoS One. 2014. V. 9. P. e106882. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0106882
  19. Park S.-H., Lee Y.-H., Chu H., Hwang S.-D., Hwang K.-J., Choi H.-Y., Park M.-Y. // Osong Public Health Res. Perspect. 2012. V. 3. P. 19–23. https://doi.org/10.1016/j.phrp.2012.01.003
  20. Zarletti G., Tiberi M., De Molfetta V., Bossù M., Toppi E., Bossù P., Scapigliati G. // Viruses. 2020. V. 12. P. 1274. https://doi.org/10.3390/v12111274
  21. Yue H., Nowak R.P., Overwijn D., Payne N.C., Fischinger S., Atyeo C., Lam E.C., St. Denis K., Brais L.K., Konishi Y., Sklavenitis-Pistofidis R., Baden L.R., Nilles E.J., Karlson E.W., Yu X.G., Li J.Z., Woolley A.E., Ghobrial I.M., Meyerhardt J.A., Balazs A.B., Alter G., Mazitschek R., Fischer E.S. // Cell Rep. Methods. 2023. V. 3. P. 100421. https://doi.org/10.1016/j.crmeth.2023.100421
  22. Tian L., Wang R.E., Chang Y.-H. // Antivir. Ther. 2012. V. 17. P. 1437–1442. https://doi.org/10.3851/IMP2469
  23. Mukhametova L.I., Eremin S.A., Arutyunyan D.A., Goryainova O.S., Ivanova T.I., Tillib S.V. // Biochemistry (Moscow). 2022. V. 87. P. 1679–1688. https://doi.org/10.1134/S0006297922120227
  24. Yu L., Zhong M., Wei Y. // Anal. Chem. 2010. V. 82. P. 7044–7048. https://doi.org/10.1021/ac100543e
  25. Mukhametova L.I., Eremin S.A. // Front. Biosci. (Elite Ed.). 2024. V. 16. P. 4. https://doi.org/10.31083/j.fbe1601004
  26. Jin B., Odongo S., Radwanska M., Magez S. // Int. J. Mol. Sci. 2023. V. 24. P. 5994. https://doi.org/10.3390/ijms24065994
  27. Desmyter A., Transue T.R., Ghahroudi M.A., Dao Thi M.-H., Poortmans F., Hamers R., Muyldermans S., Wyns L. // Nat. Struct. Mol. Biol. 1996. V. 3. P. 803–811. https://doi.org/10.1038/nsb0996-803
  28. Spinelli S., Frenken L., Bourgeois D., Ron L.D., Bos W., Verrips T., Anguille C., Cambillau C., Tegoni M. // Nat. Struct. Mol. Biol. 1996. V. 3. P. 752–757. https://doi.org/10.1038/nsb0996-752
  29. Arbabi Ghahroudi M., Desmyter A., Wyns L., Hamers R., Muyldermans S. // FEBS Lett. 1997. V. 414. P. 521–526. https://doi.org/10.1016/S0014-5793(97)01062-4
  30. Nishiyama K., Fukuyama M., Maeki M., Ishida A., Tani H., Hibara A., Tokeshi M. // Sens. Actuators B Chem. 2021. V. 326. P. 128982. https://doi.org/10.1016/j.snb.2020.128982
  31. Muyldermans S. // Annu. Rev. Biochem. 2013. V. 82. P. 775–797. https://doi.org/10.1146/annurev-biochem-063011-092449
  32. Sockolosky J.T., Dougan M., Ingram J.R., Ho C.C.M., Kauke M.J., Almo S.C., Ploegh H.L., Garcia K.C. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2016. V. 113. P. E2646–E2654. https://doi.org/10.1073/pnas.1604268113
  33. Dumoulin M., Conrath K., Van Meirhaeghe A., Meersman F., Heremans K., Frenken L.G.J., Muyldermans S., Wyns L., Matagne A. // Protein Sci. 2002. V. 11. P. 500–515. https://doi.org/10.1110/ps.34602
  34. Xu L., Song X., Jia L. // Biotechnol. Appl. Biochem. 2017. V. 64. P. 895–901. https://doi.org/10.1002/bab.1544
  35. Khodabakhsh F., Behdani M., Rami A., Kazemi-Lomedasht F. // Int. Rev. Immunol. 2018. V. 37. P. 316–322. https://doi.org/10.1080/08830185.2018.1526932
  36. Jovčevska I., Muyldermans S. // BioDrugs. 2020. V. 34. P. 11–26. https://doi.org/10.1007/s40259-019-00392-z
  37. Mei Y., Chen Y., Sivaccumar J.P., An Z., Xia N., Luo W. // Front. Pharmacol. 2022. V. 13. P. 963978. https://doi.org/10.3389/fphar.2022.963978
  38. Bao G., Tang M., Zhao J., Zhu X. // EJNMMI Res. 2021. V. 11. P. 6. https://doi.org/10.1186/s13550-021-00750-5
  39. Stevens T.A., Tomaleri G.P., Hazu M., Wei S., Nguyen V.N., DeKalb C., Voorhees R.M., Pleiner T. // Nat. Protoc. 2024. V. 19. P. 127–158. https://doi.org/10.1038/s41596-023-00904-w
  40. Горяйнова О.С., Иванова Т.И., Русовская М.В., Тиллиб С.В. // Мол. биология. 2017. Т. 51. С. 985–996. https://doi.org/10.7868/S0026898417060106
  41. Тиллиб С.В., Горяйнова О.С., Сачко А.М., Иванова Т.И., Гаас М.Я., Воробьев Н.В., Каприн А.Д., Шегай П.В. // Мол. биология. 2022. Т. 56. С. 671–684. https://doi.org/10.31857/S0026898422040127
  42. Мухаметова Л.И., Еремин С.А., Арутюнян Д.А., Горяйнова О.С., Иванова Т.И., Тиллиб С.В. // Биохимия. 2022. Т. 87. С. 2065–2077. https://doi.org/10.31857/S0320972522120211

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Российская академия наук, 2025

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».